李亚茹 王思婷 马 行*

随着各种应激因素的增加，焦虑症已经成为现代社会的常见病。在临床上，焦虑症主要表现为病人主观不安和害怕，同时伴有肌紧张、自主神经系统活动增高等躯体症状。中药方剂"逍遥散"具有疏肝解郁、养血健脾之功效，姜黄是逍遥散的药味之一，其主要有效成分为姜黄素。研究已证实姜黄素具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、降血脂和神经保护等多种药理作用[1-4]，但姜黄素是否具有抗焦虑作用未见报道。本研究拟采用应激焦虑动物模型，研究姜黄素的抗焦虑作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物昆明小鼠，雄性（20-25 克），由徐州医科大学实验动物中心提供，每笼10 只，饲养室温（22±1℃），湿度（50±10%），自然光照。实验前12 小时禁食不禁水。

1.1.2 药品和仪器

姜黄素（curcumin，储存于棕色瓶中，使用前用花生油溶解配成所需浓度）和地西泮（diazapam）均购于美国sigma 公司。DigBeh-EPM 型高台十字迷宫（上海吉量软件科技有限公司），SN－2202 型数字测温仪（北师大司南仪器厂），JZZ98－CM 型自主活动仪（中国医学科学院药物研究所）。

1.2 方法

1.2.1 动物分组与造模

昆明小鼠60 只，随机分成6 组：对照组、姜黄素组（5 mg·kg-1，10 mg·kg-1，20 mg·kg-1，40 mg·kg-1）、阳性对照地西泮组（2.5 mg·kg-1）10 只/组。每只小鼠单独放置于体积约12 cm×18 cm×13 cm 的鼠笼中，各组实验动物灌胃相应浓度的药物，对照组灌予同体积的生理盐水。连续给药7d。

1.2.2 体温测量

预先用少许硅油涂擦电子体温计小段距离，将体温计探头轻柔插入小鼠肛门2 cm，当温度显示稳定后记录读数。对每只实验动物末次给药后1 h进行体温测量，记为T1，再过10 min 测得体温记为T2，T1与T2之间的差值即为ΔT。

1.2.3 自主活动测试

将小鼠放入自主活动仪中，对其进行给药前后5min 的自主活动测试。

1.2.4 高台十字迷宫

该实验装置由两个开放臂和两个闭合臂构成一个类似“十”字形的迷宫，迷宫高离地面50 cm。末次给药后1 h 将小鼠置于迷宫中央，头朝开臂，观察者距离迷宫中心至少1 m。分别记录实验期（通常为5 min）内大鼠进入开臂和闭臂的次数和在两臂滞留时间（进出臂标准应严格界定，以四肢全部入臂或两只前爪出臂为准）。计算大鼠进入开臂次数和在开臂滞留时间分别占总次数（进入开臂和闭臂次数之和）和总时间（在开臂与闭臂滞留时间之和）的百分比，以此作为评价焦虑的指标。

1.2.5 统计学处理

实验数据均以均数±标准差表示，用SPSS 11.5 统计软件进行检验，分析各组间结果的差异。

2 结果

2.1 姜黄素对孤养应激小鼠体温的影响

由图1 结果看出，对照组小鼠两次检测的体温变化为0.97±0.05 ℃，姜黄素组和地西泮组给药前后的体温变化差别较小，与对照组相比，姜黄素组和地西泮组两次检测的体温变化有显著差异。

图1 姜黄素对孤养应激小鼠体温的影响（n=10）与对照组比较： *P ＜0.05

2.2 姜黄素对孤养应激小鼠行为学的影响

2.2.1 自主活动

表2 各组小鼠在高台十字迷宫中开臂次数和开臂时间百分比的比较（n=10）

与对照组相比，各药物组的自主活动次数无显著差异，具体见表1。

表1 姜黄素对小鼠自主活动的影响（n=10）

2.2.2 高架十字迷宫

3 讨论

孤养应激是一个经典的焦虑模型，该模型操作简单、快捷，广泛应用于抗焦虑药的研究中。各种应激，如捉拿等刺激均可引起动物体温升高[5]。这种应激反应现象与人类焦虑症状相似。目前的研究显示，孤养应激引起的焦虑主要和下丘脑-垂体-肾上腺轴功能失调有关，导致机体免疫功能下降，本次研究结果发现，姜黄素和地西泮均可降低由孤养应激引起的体温升高，提示姜黄素有可能通过免疫调节而对抗孤养应激所激发的体温升高，但具体机制有待进一步研究。

高台十字迷宫是常用的焦虑行为学之一，在高台十字迷宫中，主要是利用动物对新奇环境的探究习性和对高悬开臂的恐惧来形成动物的矛盾冲突状态，从而反映动物的焦虑状态。本实验结果显示，姜黄素20 和40 mg·kg-1剂量组可以均可以增加动物开臂次数和开臂时间的百分比，提示姜黄素可改善孤养应激引起的焦虑作用。