翟俊伟

1 实验方法和实验原理

处于无氧、少氧、氧化还原电势低的情况下，能够繁殖的细菌统称厌氧菌。厌氧菌通常分布在人体肠道、泌尿生殖、口腔中，调解正常菌群，如果人体出现菌群失调，厌氧菌将对人体多个部位进行侵犯，引发内源性厌氧菌感染。

厌氧菌的培养要保证无氧环境下操作。厌氧产气袋GENbaganaer中的成分包括活性炭、抗坏血酸钠盐和其他有机和无机成分，能够吸收02并且释放CO2。作用：有效时间为2.5小时，气袋中含02浓度<0.1%，C02气体在24小时后浓度>15%。将气袋放入已经接种好的平板，然后将气袋内空气挤出，将袋口封闭好。半小时之内，袋内处于无气环境。化学指示剂条显示白色，说明袋内符合厌氧状态。

2 具体操作方法

2.1 接种培养物

结合非选择培养基和卡那霉素一万古霉素冻溶血琼脂培养基，能够使厌氧菌检出率达到94%的标准。运用50%乙醇和标本混合作用1消失的方法，用于将芽孢梭菌分离的主要方式，成功收集标本后，尽快接种，具体接种操作为：

①接种組织块标本时，应将待检组织块移入到无菌组织研磨器中，保证操作环境处于无氧条件，或者在厌氧箱内进行操作。接种组织匀浆液标本和液体标本采用同样的操作方法。

②接种液体标本时，运用毛细吸管作为工具，滴加1滴或数滴于含维生素Kl（10μg/mL）和氯化血红素（5μg/mL）的布鲁血琼脂平板（BRBA），将三区进行明确划线，确保明确区分各个菌落。完成接种操作之后，马上把平皿放入到厌氧袋中，将厌氧产气袋打开，与化学指示剂同时放入厌氧袋，将袋内空气赶走，运用两个塑料夹子将袋口密封，孵育培养条件为35℃。……