张 宇 钱斯日古楞 王红英 王 迪 李茂林 徐 同

（大连工业大学生物工程学院， 辽宁大连116034）

沙蓬Agriophyllum squarrosum（L.） Moq.，别名吉刺儿（蒙古语）、沙米或蒺藜梗，属于藜科，沙蓬属草本植物。其茎直立，坚硬，浅绿色，表面具不明显的条稜。叶由基部分枝，无叶柄，披针形、披针状条形或条形。其穗状花序紧密，卵圆状或椭圆状，无梗，花被片膜质。果实卵圆形或椭圆形，种子近圆9 形，表面光滑，有时具浅褐色的斑点。沙蓬主要分布在俄罗斯、蒙古以及我国青海、西藏、陕西、山西、新疆、内蒙古、宁夏、甘肃等省区，多生长于沙丘和流动沙丘的背风坡上［1］。沙蓬味苦、涩，性平，具有祛疫、消渴、清热、解毒、利尿等功效，我国少数民族将其入药居多，民间也有用于治疗糖尿病［2］。有报道称，沙蓬含有丰富的生物碱、黄酮和皂苷等活性物质，且是其主要药效成分［3⁃5］。内蒙古沙漠地区生长有大量的沙蓬，起到固沙、治沙作用。本研究采用比色法和薄层层析法，对沙蓬中皂苷、黄酮、生物碱等主要药效成分进行定量分析，以期为其加以扩大应开发提供参考；同时对其蛋白质、糖类、脂肪等成分含有量进行标定，以期有利于设计沙蓬药效成分的分离和纯化工艺。

1 材料

WFJ7200 型可见分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）；DR⁃200B 型酶标仪 （德朗生物科技有限公司）；K9860 型凯氏定氮仪（山东海能科学仪器有限公司）；XN⁃21 型蛋白质消化炉（河南信诺仪器设备有限公司）；薄层层析板GF254（青岛基亿达硅胶试剂有限公司）；AB⁃8 树脂、D280 树脂（天津市光复精细化工研究所）。Rg3标准品（色谱纯，上海江莱生物科技有限公司）；芦丁（色谱纯，萨恩化学技术有限公司）；其他试剂均为分析纯。沙蓬，地上全植物，内蒙古库伦旗沙漠地区生长，由内蒙古民族大学乌力吉教授提供并鉴定为正品，使用前粉碎成50目的粉末。

2 方法与结果

2.1 沙蓬活性成分含有量测定

2.1.1 总黄酮 采用碱性条件下的NaNO2⁃Al （NO3）3⁃NaOH 显色法［6⁃7］，以芦丁为标准物（标准液质量浓度为0.23 mg／mL），得回归方程为Y＝4.279X-0.002 3 （r＝0.992 1）。计算得沙蓬地上部分干物质的总黄酮含有量为10.74 mg／g。实验采集地沙蓬地上部分中含有丰富的黄酮类，占其干重的1.07%。

2.1.2 总生物碱 采用酸碱滴定法［8］，利用氨水水解，并使用乙醚⁃氯仿（3 ∶1） 混合液提取，加H2SO4酸化NaOH滴定后，按植物生物碱平均分子量850 g／mol 计算，沙蓬干燥地上部分中的总生物碱含有量为0.055 g／g。因此实验采集地沙蓬地上部分中含有较丰富的生物碱类，总生物碱占其干重的5.50%。

2.1.3 总皂苷 采用香草醛比色法［9］，以Rg3为标准物（标准液质量浓度为0.2 mg／mL），回归方程为Y＝0.169 6X＋0.001 4 （r＝0.990 3）。计算得沙蓬地上部分干物质的总皂苷含有量为31.01 mg／g。实验采集地沙蓬地上部分含有丰富的皂苷类，总皂苷含有量达3.10%。

实验将沙蓬提取物用石油醚萃取脱脂、正丁醇萃取处理后上AB⁃8 柱脱糖、D280 柱脱色得到的沙蓬总皂苷为微黄色无定型粉末。利用薄层层析法分析结果见图1，其在硅胶板上展开后显示明显的4 个紫红色斑点，且其中2 个条带较宽，颜色也深，表明皂苷的2 个单体含有量较高，有进一步研究和开发价值。

图1 沙蓬总皂苷薄层层析图

2.2 沙蓬其他成分含有量测定 沙蓬可溶性蛋白、可溶性糖、脂肪等成分对皂苷、生物碱、黄酮类的提取分离，有阻碍作用。其可溶性蛋白、可溶性糖、脂肪含有量的确定，有利于设计主要药效成分分离工艺流程。

2.2.1 总蛋白 测定采用凯氏定氮法［10］，沙蓬的干燥粉末经消化与滴定后测得的平均含氮量为1.38%，平均蛋白含有量为8.62%。

2.2.2 可溶性蛋白 采用考马斯亮蓝比色法［11］，以牛血清蛋白为标准物（标准液质量浓度为1.00 mg／mL），得回归方程为Y＝4.669 3X＋0.004 3 （r＝0.980 7）。计算得沙蓬地上部分干物质可溶性蛋白含有量为0.063 mg／g，占0.063‰。表明沙蓬植物地上部分中可溶性蛋白含有量很少，该特性将大大降低其皂苷等活性成分提取分离的难度。

2.2.3 可溶性糖 采用苯酚⁃浓硫酸法比色法［12］，以恒定质量的葡萄糖为标准物（标准液质量浓度为0.04 mg／mL），得回归方程为Y＝37.087X＋0.122 8 （r＝0.992 6）。计算得样品中可溶性糖含有量为0.032 mg／g，占0.032‰。结果表明，沙蓬地上部分可溶性糖含有量很低，也有利于皂苷等活性成分的提取分离。

2.2.4 脂肪 采用碱水解法［13］，沙蓬的干燥粉末经浓氨水水解，石油醚提取和干燥称定质量后，计算得到沙蓬地上部分干物质的总脂肪含有量为0.006 7 g／g，平均脂肪含有量为6.73‰。结果表明，沙蓬地上部分中脂肪含有量较可溶性蛋白与可溶性糖稍高，对其活性成分提取分离时的重点是去除脂肪。

3 讨论与结论

本研究采用比色法、薄层层析等快速、便捷方法，对内蒙古库伦旗沙漠地区生长的沙蓬地上部分的皂苷、黄酮、生物碱等进行定量分析，得到皂苷、黄酮、生物碱含有量分别为3.10%、1.07%、5.50%。经薄层层析检测，沙蓬总皂苷中含4 种以上皂苷单体。沙蓬活性成分皂苷类、黄酮类、生物碱含有量较高，有进一步开发和研究价值。实验测得的可溶性蛋白、可溶性糖和脂肪的含有量均较低，对传统运用乙醇提取皂苷、黄酮、生物碱的影响较低，有利于进一步提取和开发，可简化其活性成分的分离纯化工序。实验中测得的沙蓬实际的可溶性蛋白、可溶性糖和脂肪含有量较低，对沙蓬有效成分的提取干扰较小；皂苷、黄酮、生物碱常作为某些常用药品以及部分稀有药品的有效成分［14⁃18］，3 种成分的含有量均较高。

沙蓬在我国分布广，在华北、东北、西北以及河南省和西藏自治区等省（区） 均有生长，其中在内蒙古自治区除呼伦贝尔盟林区和农区外，全区几乎均有分布。沙蓬是一种极为耐寒、耐旱的沙漠地区常见固沙植物，是亚洲大陆干旱⁃半干旱地区各种类型的流动、半流动及固定沙地上的一个广布物种，来源十分广泛。据在鄂尔多斯地区观察，沙蓬在4 月下旬至5 月上旬种子开始萌发出土，直至10 月初为蜡熟期，此后植株开始枯黄死亡，生长期130 d 左右，根系生长快且发达，有利于在流沙上定居。沙蓬虽然在春、冬季枝叶枯萎，但仍能在地表留存，可适应干旱少雨的环境，遇雨后能出现大量的新生幼苗［19］。沙蓬本身对生长环境要求较低，从播种到收获时间短，几乎不需要人工管理，大大减少了生产成本，且其对沙漠化地形有一定的固定作用。因此沙蓬的广泛种植可对区域性荒漠化有很好的治理作用，在宁夏部分地区也有种植沙蓬用来治理沙漠化［20］。

沙蓬含有皂苷、黄酮、生物碱等重要活性成分，有很好的药用开发价值；同时其对生长环境要求极低，可降低人工管理成本，又有很好的固沙、治沙和改善环境的作用，因此有很好的推广应用前景。