陈丹桢 陈杨 耜华兵 王薪淇 王英杰 毛洁 韩凤波

摘 要：應用利血平拮抗模型，研究温郁金石油醚部位抗抑郁药效，通过强迫游泳等行为学指标以及拮抗利血平实验结果，评价温郁金各浓度组抗抑郁作用，观察不同浓度温郁金石油醚部位对抑郁小鼠的抗抑郁作用。在强迫游泳实验和悬尾实验中，中、高浓度的温郁金均能显著减少小鼠的不动时间（P<0.05或P<0.01）;在糖水偏好实验中，温郁金的中、高浓度显著地增加糖水偏好值（P<0.01）;在拮抗利血平实验中，中、高浓度的温郁金均能显著地拮抗利血平所诱导的小鼠眼睑下垂（P<0.01）和运动不能现象。结果表明：温郁金石油醚提取物具有抗抑郁作用，实验中，石油醚提取物剂量0.338g/kg为抗抑郁最佳剂量。

关键词：温郁金;利血平;抗抑郁，药效学

Pharmacological  study  on  anti - depression  effect  of  petroleum  ether  extract  of  Radix  Curcumae

Chen  Danzhen， Chen  Yang，Si  Huabing，Wang  Xinqi，Wang  Yingjie，Mao  Jie，Han  Fengbo

（Jilin  Agricultural  Science  and  Technology  University，Academy  of  food  engineering，Jilin  132101，China）

Abstract：The  antidepressant  effect  of  petroleum  ether  fraction  of  Radix  Curcumae  was  studied  by  reserpine  antagonizing  model，and  the  antidepressant  effect of  each  concentration  group  of  Radix  Curcumae  was  evaluated  by  forced  swimming  and  other  behavioral&nbsp; indexes，to  observe  the  antidepressant  effect  of petroleum  ether  fraction  of  Radix  Curcumae  in  different  concentrations  on  depressed  mice.In  forced  swimming  test  and  tail  suspension  test，middle  and  high concentrations  of  Radix  Curcumae  could  significantly  reduce  the  immobility  time  of  mice（P<0.05或P<0.01），the  mean  and  high  concentrations  of  Radix  Curcumae  significantly  increased  the  sugar-water  Preference（P<0.01），the  moderate  and  high  concentrations  of  Radix  Curcumae  could  significantly antagonize  the  BLEPHAROPTOSIS（P<0.01）and  immobility  induced  by  reserpine.The  results  showed  that  petroleum  ether  extract  of  Radix  Curcumae  had antidepressant  effect.In  the  experiment，0.338g·kg-1  was  the  best  dose.

Key  words：Radix  Curcumae;Reserpine;Depression;Pharmacodynamics

在中医理论认为抑郁症属于“郁证、不寐、脏躁”的范畴，其病理机制[1]为气机失调，内气积滞，导致肝气郁结，心神失养。温郁金作为“浙八味”之一，在中医配方[2]中应用已逾千年，具有行气解郁、清心凉血、利胆退黄的功效，用于疏肝理气解郁为主要疗效的中药复方以及中药，其抗抑郁作用已受到学者们的关注。

温郁金于治疗抑郁症的复方中出现的频率较高。赵铮蓉[3]等人等人温郁金抗抑郁活性部位筛选的研究结果显示，抗抑郁作用效果明显，其中，石油醚和乙酸乙酯萃取后的部分效果显著。为了深入探究药效学关系，以温郁金石油醚萃取物研究抗抑郁作用，为寻找、开发中药抗抑郁新药提供思路。

1 材料与仪器

1.1 材料与试剂

温郁金，姜科植物温郁金（Curcumawenyujin  Y.  H.  Chen  et C.  Ling）的干燥塊根（宁波药材公司），悬尾箱（自制），利血平（天津金耀药业有限公司），盐酸氟西汀（苏州中化药品工业有限公司），所有试剂均为国产分析纯。

1.2 仪器与设备

旋转蒸发仪（N-1100S  上海爱朗仪器有限公司）;电子天平（奥豪斯仪器有限公司）等。

1.3 试验动物

清洁级昆明（KM）小鼠，20±2g，雌雄各半，共108只，由长春医学动物实验研究中心提供。

2 方法与结果

温郁金干燥块根，用95%的乙醇回流提取（料液比为1∶10），减压回收乙醇后得到温郁金乙醇提取物浸膏，以热水溶解，石油醚多次萃取，合并萃取液，浓缩，浸膏得率为1.69%，以吐温-80溶解备用，配制成按生药量[3]计：10g/kg（低），20g/kg（中），40g/kg（高）三组浓度备用。取试验小鼠，平衡饮食3d后，按性别体重随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、温郁金低、中、高浓度组，共六组，具体见表1。

分组后，对小鼠按照安排进行灌胃给药，2次/d，按0.2mL/10g灌服，于每天上午8∶00，下午2∶00进行，连续14d。

2.1 强迫游泳实验

末次给药1h后，随机取各组小鼠六只，置于水深10cm，恒温（25±1℃）池中，从入水开始计时，进行6min的强迫游泳，观察并记录其后4min的不动时间，不动判定标准：小鼠不再主动挣扎、不扭动，结果见表2。

由表2可知，温郁金中浓度组优于低、高浓度组，其抗抑郁作用最为显著。对比空白对照组，温郁金石油醚提取物各浓度组，阳性对照组的小鼠强迫游泳的时间均明显降低，具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。与模型组相对比，温郁金石油醚提取物各浓度组，阳性对照组小鼠强迫游泳时间均显著的减少，实验结果具有统计学差异（P<0.01）。

2.2 悬尾实验

常与强迫游泳实验联合，以“行为组学”形式[4]共同评价，各组随机另取六只小鼠，末次给药1h后，距尾尖部2cm处，将小鼠用胶带系紧，倒挂在密闭的不透光箱子（20cm×20cm×30cm）中，其头部距箱底约5cm，呈倒挂状态，从悬挂开始计时6min，观察并记录其后4min的不动时间（以小鼠主动停止挣扎，悬挂不扭动判定为不动），结果见表3。

由表3可知，温郁金中浓度组优于低、高浓度组，其抗抑郁作用最为显著。对比空白对照组，温郁金石油醚提取物的各浓度组，阳性对照组的小鼠悬尾时间均显著的减少，具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。与模型组相对比，温郁金各浓度组，阳性对照组的小鼠悬尾时间均显著的减少，具有统计学差异（P<0.01）。

2.3 糖水偏好实验

糖水偏好实验[5-7]可以反映动物内源性抑郁症的中心症状，即快感缺失。首先于安静环境内训练小鼠适应糖水性，在每笼中放置2个相同水瓶，首次一天内，2瓶中均装1%蔗糖水200mL;第2天，将另一瓶换成等重纯水。

禁食禁水24h后，放置200mL的1%蔗糖水一瓶和等重纯水一瓶，1h后，分别称重2个水瓶，以糖水和纯水的减失量计算糖水偏好指数，糖水偏好指数%=糖水消耗量/（糖水消耗量+纯水消耗量）×100%[8]，结果见表4。

由表4可知，温郁金高浓度组优于中、低浓度组，其抗抑郁作用最为显著。对比空白对照组，温郁金石油醚提取物各浓度组，阳性对照组及模型组小鼠的糖水偏好指数均显著的减少，具有统计学意义（P<0.01）。与模型组相对比，温郁金石油醚提取物各浓度组，阳性对照组及空白对照组小鼠糖水偏好指数均显著增加，具有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。

2.4 拮抗利血平实验

以眼睑下垂、运动不能进行考察。眼睑下垂观测：各组取六只小鼠[9]，腹腔注射利血平1h后，将小鼠单个竖直垂放15s，观测小鼠眼睑下垂的程度，按照评分标准打分。

评分标准[10]：眼睑全部睁开为0分，3/4睁开为1分，1/2睁开为2分，1/4睁开为3分，不睁开为4分。运动不能观测：取眼睑下垂观测后的小鼠[11]，放入直径为7.5cm的圆圈内，观察并记录15s内出圈次数。试验结果见表5。

由表5可知，温郁金高浓度组优于中、低浓度组，其抗抑郁作用最为显著。对比空白对照组，温郁金石油醚提取物各浓度组，阳性对照组及模型组小鼠眼睑下垂评分均显著升高，具有统计学意义（P<0.01）。与模型组相对比，温郁金石油醚提取物中浓度组和高浓度组，阳性对照组及空白对照组小鼠眼睑下垂评分均显著降低，具有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。与模型组相比较，温郁金石油醚提取物中、高浓度组可显著提高小鼠出圈率，其中中浓度组抗抑郁效果最为显著。

3 结论与讨论

本实验通过行为绝望实验的强迫游泳和悬尾实验，以及糖水偏好实验、拮抗利血平实验，研究温郁金石油醚部位的抗抑郁作用。虽然个别实验效果并不明显，但是强迫游泳实验、悬尾实验以及拮抗利血平实验效果显著，对于温郁金抗抑郁最适浓度的研究具有实验意义。由以上实验结果可知，温郁金石油醚部位抗抑郁作用比较显著，且与浓度相关，中、高浓度温郁金石油醚提取物抗抑郁作用显著，考虑到药物利用率等因素，中浓度组剂量略优于高浓度组，即0.338g/kg效果最佳。

参考文献

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[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典·一部.广州：广州科技出版社，2005：144-145.

[3] 赵铮蓉，张萍，吴月国，等.温郁金抗抑郁活性部位的筛选[J].中华中医药杂志，2011，26（08）：868-869.

[4] 汪燕，肖伟，章显宝，等.应激性动物抑郁模型的建立及其评价研究概况[J].甘肃中医学院学报，2015，32（02）：70-74.

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[7] 邓祖跃，袁钰萍，吕龙飞.灵芝孢子油对抑郁小鼠行为学的影响及其神经生理机制[J].中国药学杂志，2017，52（15）：1325-1330.

[8] Chen  C，Yang  JM，Hu，TT，et  al.Elevated  dopamine  D2 receptor  in  prefrontal  cortex  of  CUMS  rats  is  associated  with downregulated  cAMP-independent  signaling  pathway[J].Physiol  Pharmacol，2013，91：750-758.

[9] 程瑞鳳，景晶，华冰，等.甘草总黄酮提取部位抗小鼠抑郁活性可能与其增强中枢5-羟色胺能神经功能有关[J].中国药理学与毒理学杂志，2014，28（04）：484-490.

[10] Bourin  M，Poncelet  M，Chermat  R，et  al.The  value  of  the  reserpine test  inpsychopharmacology[J].Arzneimittelforschung，1983，3（8）：1173-1176.

[11] 贺妮，侯宇，柏慧，等.白芍提取物抗抑郁及抗炎作用的研究[J].世界中西医结合杂志，2018，13（03）：348-352.