吴晓艳，赵铁民

青海红十字医院(西宁 810000)

输血医学属于临床治疗中的二级学科，在对患者进行抢救与治疗的过程中发挥着极为重要的作用。输血安全的管理关乎每个患者的生命安全，也是临床医疗工作人员广泛关注的重要问题。血型鉴定与交叉配血是整个输血过程中的关键环节，该环节的质量好坏对输血安全有重大影响，减少和避免同种免疫造成的非溶血性输血反应及溶血性输血反应是确保输血安全的关键[1]。低离子凝聚胺技术近年来在临床上被广泛使用，因此本研究选择本院受血者130例为研究对象，在临床输血检验中应用低离子凝聚胺技术，将其与盐水法检验的结果进行比较，探讨其临床应用价值。现报告如下。

对象与方法

1 研究对象 选择受血者130例，按照不同检验方案分为观察组(65例)与对照组(65例)。观察组男性35例，女性30例；年龄12～70岁，平均(41.74±10.87)岁。对照组男性32例，女性33例；年龄13～75岁，平均(42.95±12.39)岁。对比观察组与对照组一般资料，无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。实验设置阴性对照(由氯化钠和磷酸盐等制备而成，不含任何人红细胞血型抗体)、自身对照和阳性对照(由氯化钠、磷酸盐和不完全抗-D等制备而成)。所有患者参与本次研究均为自愿，且排除严重血液系统疾病。

2 研究方法

2.1 观察组：采用低离子凝聚胺技术。试剂选用：凝聚胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所有限责任公司；批号：20190926)，包括低离子介质溶液、凝聚胺溶液和重悬液；标准血清(上海血液公司；批号：20190814)；抗-D单克隆抗体(上海博力医学生物科贸有限公司；批号：BMA1902B)。具体方法：取试管2支，在试管上标记受血者及供血者的编码，并标注主侧管与次侧管。主侧加入2滴受血者血清，再加2%～5%供血者红细胞悬液1滴。次侧加入供血者血清2滴，再加2%～5%受血者红细胞悬液1滴。主侧和次侧分别加入0.6 ml低离子溶液，将其混匀后放置于室温环境下30 s，后加入凝聚胺溶液2滴，均匀混合以后静置15 s。使用离心机以3400 r/min离心15 s，倒出上清液，轻摇试管以观察红细胞凝集状态。目测有明显凝集现象出现后，分别取2滴重悬液加入主侧管与次侧管，再次轻摇试管后观察结果。凝集于1 min内消失，表示非特异性凝集，呈阴性，配血结果相合。凝集不消失则表示抗原抗体结合引起特异性凝集，呈阳性，配血结果不合。

2.2 对照组：采用盐水介质法。取清洁干燥试管，加入供血者及受血者血液各2 ml。分离血清，滴入盐水制成2%～5%的红细胞悬液。再取2支试管，标注主侧管与次侧管。主侧中加入供血者红细胞悬液1滴与受血者血清2滴，次侧中加入受血者红细胞悬液1滴与受血者血清2滴，轻摇混匀，低速沉淀2 min，观察结果[2]。

3 观察指标 对比观察组和对照组中5种抗体的检验结果，凝集强度由弱到最强依次以“+”～“”表示，无凝集用“-”表示。统计两组凝集细胞例数，同时对观察组中红细胞凝集消失情况进行观察[3-5]。

4 统计学方法 选用SPSS 18.0统计学软件进行分析。计数资料以例(%)表示，采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 两组抗体检验结果 见表1。观察组抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-D阳性对照凝集强度较对照组显著增高(P<0.05)。

表1 两组抗体检验结果

2 两组凝集细胞例数比较 观察组共检出13例凝集细胞，检出率20.00%。对照组共检出2例凝集细胞，检出率3.08%。观察组凝集细胞例数检出率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 观察组红细胞凝集消失情况 见表2。观察组特异性凝集在3 min内均未消失，而非特异性凝聚在10 s内消失的有35例(53.85%)，在11～20 s内消失的有30例(46.15%)。

表2 观察组红细胞凝集消失情况[例(%)]

讨 论

随着输血医学的不断发展以及对《临床用血技术规范》的执行力和监督力的加强，临床用血规范化程度也在不断加强，输血安全的观念深入人心，临床医疗工作者对此的重视程度空前提高[6-8]。临床实践表明，对患者的血型进行正确的鉴定，才能减少和避免发生急性或迟发性输血反应，以确保患者的输血安全与生命安全[9]。临床目前主要采用盐水介质法以及低离子凝聚胺技术进行血液交叉配合检验。盐水法是临床常用的交叉配血法，其主要优点是试验方法简单，操作快捷[10-12]。该法的主要原理是：在受血者及供血者的交叉配血反应中，若血清中存在针对ABO以及其他血型抗原的IgM抗体，在离心作用以及盐水介质的直接作用下，可见抗原抗体结合，并用肉眼可观察到凝集，本试验主要包括主、次侧，主侧主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体以及补体依赖性的意外抗体，而次侧则是检查供血者的血清中有无破坏受血者红细胞的抗体与其他抗体[13]。但由于其只能检出不配合的完全抗体，而无法检查不配合的不完全抗体，可能出现由不完全抗体造成的输血反应，临床安全性较低[14]。

相较盐水介质法而言，低离子凝聚胺技术安全性更高，其原理是：凝聚胺是一种高价阳离子季铵盐，溶解产生的正电荷能中和红细胞膜表面带有的负电荷，减弱红细胞间的静电斥力，促使红细胞凝集或聚集，而低离子溶液对红细胞中的Zeta电位有显著的降低作用，可使得抗原与抗体之间的吸引力进一步增强。若血清中存在IgG或IgM类血型抗体时，可与红细胞发生紧密结合，此时将重悬液加入其中，能够将聚凝胺的正电荷消除，使得红细胞与IgG或IgM类血型抗体产生的凝集不散开，而对于非特异性凝集，加入重悬液可使非特异性凝集消失[15]，因此该方法能够快速、准确地检出IgG和IgM抗体。此外，该方法除了检测出完全IgG抗体外，对于特殊的IgG抗体以及不完全IgG抗体均具备比较高的灵敏性，这一点弥补了盐水介质法的不足。

高原地区特殊的地理人文环境使得其临床输血情况与内陆地区有一定差异，因此在临床输血过程中，因地制宜地开展输血工作成为临床输血工作的重中之重。由于人们受到宗教观念与传统文化观念的影响较深，加之过去血源较为紧张，因此在高原地区开展输血工作的难度较大。近年来全国各地包括高原牧区在内均成立了中心血站，加上无偿献血宣传工作到位，使得血源不足等问题得到有效解决。高原地区持刀械斗的情况较为常见，加上交通不便，经常发生车祸，由于创伤导致大量出血的情况较平原地区比例更高，输血是挽救患者生命的重要措施，尽早进行输血能够有效减轻损伤部位及周围部分的水肿情况，有利于改善患者预后，尽早纠正其外科创伤或休克状态。

本研究结果表明，盐水法只能检测出完全抗体，对于ABO血型以外的抗体均不能检出，而低离子凝聚胺技术则能够促进红细胞与血清中的不规则抗体(多为IgG)相结合。IgG抗体主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生，在盐水介质中无法进行凝集，本研究结果提示：观察组抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-D阳性对照凝集强度较对照组更高(P<0.05)；观察组中13例凝集细胞被检出，检出率20.00%，对照组中2例凝集细胞被检出，检出率3.08%，观察组高于对照组(P<0.05)。此外，观察组中，特异性凝集在3 min内均未消失，而非特异凝聚在10 s内消失的有35例(53.85%)，在11～20 s内消失的有30例(46.15%)。从该结果中能够看出，相较于盐水介质法，低离子凝聚胺法具有更高的灵敏度，凝集细胞被检出率也更高，而且是肉眼可见的细胞凝集，而盐水介质法检出率就相对更低，只能在显微镜下有2例红细胞凝集。在临床实际工作中，在对输血安全进行保障的同时，尽可能减少配血时间，提升输血效率，能够在较大程度上为患者救治工作争取时间，降低死亡率[16]。此外，低离子凝聚胺技术用到了假凝集清除液，其能消除非特异性凝集，减少假阳性配血的发生率。据文献[17]报道，低离子凝聚胺技术不仅能够对红细胞表面相应抗体进行快速检测，还能规避非特异性凝集的发生，本研究中所有红细胞的非特异性凝集均在3 min内完全消失，与其报道具有一致性。

综上所述，低离子凝聚胺技术在交叉配血、血型鉴定以及不规则抗体中的应用价值非常显著，可快速检出IgG、IgM抗体，并促进不规则抗体与红细胞反应，促进特异性凝集，且凝集现象非常明显，而非特异性凝集消散时间快。该方法具有操作简单、效率高、耗时短、准确性高等优势，应用于临床配血，可有效降低溶血反应发生率，从而有效保障输血安全，减少输血不良事件，值得临床应用。