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朝鲜鹌鹑GNAS基因表达、克隆及其多态性与羽色的相关性

2020-08-31刘坤举张小辉庞有志赵淑娟祁艳霞王乾昆

浙江农业学报 2020年8期

刘坤举,张小辉,*,庞有志,赵淑娟,祁艳霞,王乾昆

(1.河南科技大学 动物科技学院,河南 洛阳 471003; 2. 洛阳市动物遗传育种重点实验室,河南 洛阳 471003)

羽色是家禽重要的质量性状,其遗传效应是近年来研究的热点。黑色素的数量、性质与分布是导致家禽羽色多样性的重要原因[1]。作为羽色形成的基本物质,黑色素可分为真黑素和褐黑素。真黑素包括黑色和褐色,褐黑素包括黄色和红色,2种黑色素之间的相互转化影响羽色的形成[2]。影响黑色素形成的基因有很多,鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α亚基(guanine nucleotide-binding protein Gs subunit alpha,GNAS)是位于细胞膜内侧的一类信号传导蛋白,参与细胞的多种生命活动[3]。在黑色素代谢通路中,GNAS与黑素皮质素受体1(melanocortin receptor-1,MC1R)通过跨膜结构结合,激活腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,ADCY),催化ATP产生第二信使,影响细胞内黑色素的合成[4]。

GNAS基因是影响乌骨鸡黑色素沉积的候选基因,该基因位于20号染色体Fm区域的拷贝数重复区(copy number variations,CNVs)内,与黑色素的沉积密切相关[5]。已有学者发现,GNAS基因突变可能会导致人类患黑色素瘤病[6-7]。综上,GNAS基因可能与黑色素形成有关。

本研究采用实时荧光定量PCR技术探究栗羽和白羽朝鲜鹌鹑不同胚胎发育阶段GNAS基因的mRNA相对表达量,并对GNAS基因单核苷酸多态位点(single nucleotide polymorphisms,SNPs)进行检测,分析SNPs与朝鲜鹌鹑羽色性状之间的关联性,旨在为探究朝鲜鹌鹑及其他禽类羽色形成、变化等研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

栗羽和白羽朝鲜鹌鹑受精蛋购自市场。取栗羽和白羽朝鲜鹌鹑受精蛋各60枚进行孵化,取孵化至6、8、10、12、14 d的鹌鹑胚胎翅尖组织置于液氮中保存,用于后续总RNA的提取;……

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