简咏男 郑文兰

[摘要] 目的 探讨人输卵管妊娠滋养细胞体外培养的方法与鉴定。 方法 取在贵州中医药大学第一附属医院妇科住院部住院的早期输卵管妊娠3例患者的绒毛组织，采用胶原酶-胰酶混合消化法消化细胞，差速贴壁法纯化分离细胞，最后通过免疫荧光共聚焦方法对培养出的细胞进行细胞鉴定。 结果 免疫荧光双标记染色检测到角蛋白与波形蛋白共表达。 结论 通过显微镜和免疫荧光检测细胞外形和骨架，初步判定该细胞可能为滋养细胞。

[关键词] 滋养细胞;原代培养;细胞鉴定;胎盘绒毛;胰酶消化

[中图分类号] R711          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2020）07（a）-0008-04

[Abstract] Objective To explore the methods and identification of tubal pregnancy trophoblasts in vitro. Methods The villi of 3 patients with early tubal pregnancy admitted to the Department of Gynecology， the First Affiliated Hospital of Guizhou University of Chinese Medicine were taken. Collagenase-trypsin mixed digestion method was used to digest cells， and differential adherence method was used to purify and isolate cells. Finally， the cells were identified by immunofluorescence confocal method. Results Co-expression of keratin and vimentin was detected by immunofluorescence double-labeling staining. Conclusion Microscope and immunofluorescence can detect cell shape and skeleton. It is preliminarily determines that the cell may be a trophoblast cell.

[Key words] Trophoblast cell; Primary culture; Cell identification; Placental villi; Trypsin digestion

近年来，异位妊娠发病率呈现年轻化趋势，且逐年上升，为保留治疗后输卵管的完整性，提高今后的再次受孕率，中药治疗因其副作用小而备受人们关注，且在临床治疗中也取得了满意的效果，但其机制研究尚处于初级阶段。由于在人体无法进行相关的在体研究，因此输卵管妊娠绒毛滋养细胞的体外培养便成为进行相关实验研究的前提。本研究将早期的人输卵管妊娠患者的绒毛组织进行体外培养，为后期输卵管妊娠疾病的相关研究提供较好的模型，为推动中药治疗异位妊娠滋养细胞疾病提供良好的实验基础。

1 材料与方法

1.1 绒毛组织

选取在贵州中医药大学第一附属医院妇科住院部住院的早期输卵管妊娠患者3例，妊娠周數为孕5～8周，平均（6.33±0.58）周;孕妇年龄20～30岁，平均（26.67±2.08）岁;无其他疾病;未经药物治疗;直接手术的输卵管妊娠患者的新鲜绒毛组织。……