肖芳

（南昌大学第四附属医院 江西南昌330003）

雷公藤甲素（Triptolide,TP）是雷公藤的主要成分之一，具有显著的免疫抑制和抗炎镇痛作用，但它的毒性很强，急性中毒主要表现为肝损伤和胃肠道毒性，长期毒性表现为抑制骨髓，损害心脏、肾脏等器官[1～2]。白芍，苦、酸，微寒。归肝、脾经，具有敛阴柔肝、缓急止痛的作用。现代研究表明，白芍具有护肝和调节免疫的作用，《中华本草》中记载白芍具有抗炎和调节免疫的作用。有研究表明，白芍可对抗雷公藤多苷造成的小鼠急性肝损伤，降低血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）及丙二醛（MDA）含量，提高机体抗氧化能力[3～4]。本研究以正常人肝细胞L-02 细胞为模型研究TP 配伍芍药苷对L-02 细胞毒性的影响。现报道如下：

1 材料

SW-CJ-2F 双人双面超净工作台（苏州净化设备有限公司），L-02 细胞（购于中科院上海细胞库），噻唑兰（MTT，北京索来宝有限公司），酶标仪（Thermo公司），96 孔细胞培养板（赛默飞世尓生物化学制品有限公司），雷公藤甲素对照品（成都普菲德生物科技有限公司，批号：20150813，纯度≥98%）；芍药苷对照品（成都普菲德生物科技有限公司，批号：16011402，纯度纯度≥90%）。

2 方法

2.1 细胞培养 将L-02 细胞置于常规培养皿内，以高糖DMEM 培养基（含10%胎牛血清）在37℃、5%二氧化碳（CO2）和相对湿度90%的培养箱内培养，取对数生长期L-02 细胞，弃去原有培养液，用胰蛋白酶消化，将细胞均匀种于96 孔板上，所用细胞密度为 5×104个 /ml，每孔 200 μl，每个浓度设置 6个复孔，分别设空白，阴性和8 个浓度，96 孔板最外圈加 200 μl 无钙镁的 D-Hanks 缓冲液（HBSS）进行液封。细胞种板完后放于细胞孵育箱中培养24 h。……