童九辉,王 斌,袁 鹤,张 华,宋永周,马 维

(河北医科大学第二医院骨科,石家庄 050000)

骨折不愈合是骨科医生共同面对的问题。Mills[1]通过研究发现苏格兰地区大约有超过千人的患者存在不同程度的骨折延迟愈合或不愈合,在整个英国这个数据可以达到11700 人。 促进骨折愈合的因素有很多,Morley 等[2]及刘继超等[3]发现脑外伤合并骨折时碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)以及血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor ,PDGF)的表达水平增高等。 郭志豪等[4]和唐彦峰等[5]也分别通过骨折周围局部应用bFGF、PDGF 证实其可以加速骨折愈合。 大量实验已经证明单独应用bFGF 或PDGF 可以加速骨折愈合,但对其可能的作用机制并未阐述清楚。 本实验旨在通过联合应用bFGF、PDGF,来了解其对大鼠骨折愈合过程的影响,研究其作用机制,也为药物未来能促进骨折愈合的临床应用提供研究基础。

1 材料和方法

1.1 实验动物

48 只成熟雄性清洁级SD 大鼠,约8 周龄,体重在210 ～230 g,购自河北省实验动物中心[SCXK(冀)2018-004],无菌实验操作于河北医科大学第二医院动物实验室进行[SYXK(冀)2016-003],已通过河北医科大学第二医院科研伦理委员会的批准(2019-P019),并遵照实验动物使用的3R 原则对实验动物提供人道关怀。

1.2 主要试剂与仪器

碱性成纤维细胞生长因子(厂家:武汉华美,货号:CSB-YP008625RB)；血小板衍生生长因子(厂家:武汉华美,货号:CSB-YP017708RA)；抗体点样保护液(北京博奥生物,货号:440015)；牛血清白蛋白(BIOFROXX 公司)；bFGF 抗体(厂家:北京博奥森,货号:bs-0217R)；PDGF 抗体(厂家:北京博奥森,货号:bs-10073R)；补体C3 抗体(厂家:北京博奥森,货号:bs-2934R)；PBST 洗片缓冲液(河北博海生物自配)；……