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人工培养粉被虫草菌丝体和孢梗束的代谢组差异

2020-08-13何亚琼尹春林谢少康胡丰林

牡丹江医学院学报 2020年3期
关键词:差异

何亚琼,尹春林,朱 梦,谢少康,胡丰林

(1.皖北卫生职业学院,安徽 宿州 234000;2.安徽农业大学,安徽 合肥 230036)

粉被虫草(Cordyceps pruinosa Petch),属于子囊菌纲,肉座目,麦角科,虫草属,其无性型为马利亚霉新种(Mariannaea pruinosa Liang sp.nov.)[1]。粉被虫草具有抗紫外线辐射、抑制细菌、免疫调节、抗癌和抗炎等生物学活性[2-7],利用NMR和气质联用(GC-MS)对不同培养基和光照条件培养下的粉被虫草代谢组进行分析,共鉴定了5种醇、21种氨基酸、15种有机酸、4种嘌呤、3种嘧啶、7种糖、11种脂肪酸和5种其他代谢物[8],可见将其作为保健品,具有良好的开发前景。代谢组学可分析生物体内所有代谢物,通过生物信息化学、计量学和统计学分析,发掘其内在联系,研究生物体系的代谢过程及代谢途径[9]。本研究采用基于HPLC-TOF-MS代谢组分析技术,比较人工培育的粉被虫草菌丝体和孢梗束代谢差异,为后期的合理开发建立理论基础。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂Agilent 6210飞行时间高分辨液质联用分析仪,购于美国Agilent公司;分析型色谱柱Agilent poroshell 120 EC-C18(2.7μm,3.0mm×100mm),购于美国waters公司;电子天平(JA5103N),购于上海民桥精密科学仪器公司;FreeZone12冷冻干燥系统,购于美国Labonconco公司;离心真空浓缩仪(RVC 2-25),购于德国Christ公司;数控超声波清洗器(JK-300DB),购于合肥金尼克机械制造有限公司;全温振荡培养箱(ZQZY-70CF),购于上海知楚仪器有限公司;光照培养箱(DHP-90)上海一恒科学仪器有限责任公司。HPLC级甲酸、甲醇和乙腈,都购于Thermo Fisher Scientific公司;纯化水,购于屈臣氏集团有限公司。

1.2 菌株和培养粉被虫草无性型-粉被马利娅霉Mp09来自安徽农业大学微生物防治重点实验室。

菌种培养:在超净工作台,用接种针挑取适量菌接种于SDAY培养基中(葡萄糖40g/L,蛋白胨10g/L,酵母浸出粉10g/L,琼脂20g/L),25℃培养7d。……

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