李爱明，刘 克，王园园，王 乾

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)占肺癌的85%[1, 2]。尽管近年来在癌症研究和治疗方面取得了较大进展，但NSCLC的预后仍然很差，其5年生存率仅为15%[3]。因此，了解NSCLC的发病机制并确定新的治疗靶点非常重要[4]。最近研究发现，miRNA与肺癌的发展密切相关，且有用miRNA阵列实验发现miR-30a-5p在NSCLC组织中的表达显著下调[5-7]。然而，miR-30a-5p在非小细胞肺癌中的作用和分子机制仍未完全阐明。新式激酶家族1[Novel (nua) kinase family 1，NUAK1]，也称为KIAA0537/ARK5，已被确定为单磷酸腺苷激活蛋白激酶相关激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase related kinase，ARK)家族的第5个成员[8]。NUAK1可以被Akt直接激活，活化的NUAK1可以在葡萄糖饥饿和死亡受体刺激过程中促进细胞存活[8]。最近有研究表明，NUAK1的高表达与结肠癌的肿瘤进展有关，并且可以通过与p53的直接相互作用来调节细胞增殖[9]。此外，NUAK1高表达与预后不良相关，并参与NSCLC细胞的迁移和侵袭[8]。然而，NUAK1在NSCLC中的调控机制仍不清楚。本研究将通过研究miR-30a-5p、NUAK1在NSCLC中的表达及miR-30a-5p靶向NUAK1对NSCLC细胞A549增殖、迁移和侵袭的影响，以揭示NSCLC发生发展的分子机制，为临床诊断治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2016-09至2019-03我院行手术切除治疗的NSCLC患者癌组织和癌旁组织标本各64例，其中男37例，女27例，年龄37～76岁，平均(47.3±10.8)岁；高分化26例，中低分化38例；TNM分期Ⅰ/Ⅱ期24例，Ⅲ/Ⅳ例40例。所有样本组织均经至少2名病理医师诊断为NSCLC，且患者术前未接受任何治疗。本研究方案经医院伦理学委员会审核批准，受试患者或其家属均签署知情同意书。

1.2 细胞 人正常肺上皮细胞BEAS-2B和非小细胞肺癌细胞系H460、H1299和A549购自美国模式培养物保藏所(american type culture collection，ATCC)，保存于我院中心实验室的液氮罐中。……