庄云英，张海燕 综述 曾清芳 审校

胰腺癌是消化系统肿瘤中恶性程度较高的一种，具有较高的病死率。据统计，2019年美国有56 770例胰腺癌新病例和45 750例胰腺相关死亡病例，与其他常见的癌症相比，胰腺癌的患者预后一直未得到明显改善，5年相对生存率仅为9%[1]。尽管国内外各个科研团队在探究胰腺癌更好的治疗策略方面已经付出了相当大的努力，如靶向治疗、免疫治疗和潜在的规律成簇的间隔短回文重复序列(clusteredregularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR) 相关蛋白9(RISPR/Cas9)定向基因治疗等，但手术、放疗和化疗仍然是当前临床上胰腺癌的主要治疗方法。

目前，RISPR/Cas9已经成为一种强大的基因编辑工具，并在精准医疗领域具有潜力。CRISPR重复序列最早由Ishino等[2]在1987年发现，随后在2012年，Jinek等[3]的研究证明了一个内切酶可以被一个双RNA结构诱导直接切割目标DNA。从那时起，CRISPR/Cas9技术迅速发展，并促进基础和临床研究取得了惊人的进展。与其他基因编辑技术相比，如巨核酸酶 (meganucleases，MNs)、锌指核酸酶 (zinc finger nucleases，ZFNs)、转录激活子样效应核酸酶(transcription activator-like effector nucleases，TALENs)，CRISPR/Cas9技术成本更低、效率更高、应用更简单[4]。由于近年来CRISPR/Cas9技术在多个领域取得了突飞猛进的进展，笔者就CRISPR/Cas9及其在胰腺癌中的应用进行综述。

1 CRISPR/Cas9技术

有规则间隔的短回文重复聚类 (CRISPR)是Ishino等[2]在大肠杆菌中发现了一段高度保守的核苷酸序列，它位于同工酶转化碱性磷酸酶基因3’末端的侧边区域，表现为14 bp的二元对称。然而，直到2007年Barrangou等[5]将嗜热链球菌暴露于噬菌体中并对由此产生的抗噬菌体变体进行测序，人们才充分认识到CRISPR序列的功能和生物学重要性。……