周雪涛，张鸿，杨杨，李慧敏，张东升#

石家庄市第三医院1心胸外科，3病理科，石家庄050000 2正定县人民医院急诊科，石家庄050000

世界卫生组织发布，肺癌是引发世界人群死亡的主要癌症之一，在男女发病、死亡的所有恶性肿瘤中均居前三位，所以及时预防诊治肺癌是当前医药研究人员肩负的重要使命之一[1]。目前细针吸取细胞学（fine needle aspiration cytology，FNAC）检查法是临床进行肺癌诊断的重要方法[2‐3]。然而，在病灶部位实施FNAC后会存在肿瘤细胞沿针道转移的风险，因此寻求有效预防并抑制该现象的治疗方案是目前亟待解决的问题[4]。本研究经皮肺穿刺肺癌兔并给予化疗药物，观察对肿瘤细胞沿针道转移率的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

62只家兔（河北医科大学中心实验室提供），每只月龄4个月，雌雄各半，体重2.0～2.5 kg，平均2.28 kg；VX2瘤株由河北医科大学中心实验室提供；双套管切割活检针（18G‐Gallini切割活检针）购自巴德医疗科技（上海）有限公司。

1.2 研究方法

1.2.1 VX 2瘤株的制备[5]在无菌超净台取出VX2并剔除坏死组织、结缔组织、肌腱、肌肉及血管，且去除肿瘤组织边缘生长旺盛的鱼肉样组织，用生理盐水冲洗3次，取肿瘤组织（小于1 mm3），浸泡于4℃的生理盐水中备用。

1.2.2 建立兔VX 2肺癌模型[6]给予家兔耳缘静脉注射利多卡因（2%），麻醉后将其仰卧固定，右前胸壁备皮，常规消毒，取穿刺针，于家兔肩胛骨前缘及右胸4～5肋间交点处刺入肺组织，固定针鞘，推入平头针芯内瘤块后拔出针，用无菌纱布按压穿刺位置30 s，术后常规注射青霉素（每天20万单位），连续给药3天，预防感染。肺癌兔模型建立成功率为70.97%。

1.2.3 模型成功标准使用计算机断层扫描（CT）技术观察肺部肿瘤生长状况，若肿瘤长至直径1 cm，且无转移现象即为成功。

1.2.4 实验方法将家兔按体重分层分为治疗组与对照组，每组均雌雄各半，治疗组共32只，对照组30只，所有患兔在CT引导下成功进行FNAC 5次，对照组穿刺后保留套管拔出针芯，给予安慰剂并撤出套管。治疗组在进行穿刺后保留套管拔出针芯，边给予化疗药物顺铂（2 mg）和丝裂霉素（0.2 mg）边撤出套管。治疗组与对照组患兔术后均进行常规注射青霉素（每天20万单位），连续给药3天，预防感染。所有患兔饲养2周，解剖脏层胸膜、壁层胸膜及胸壁组织进行病理细胞学检查，通过光学显微镜观察肿瘤细胞的转移情况，若肿瘤细胞沿着针道方向转移，即为阳性转移。实验过程中排除动物穿刺死亡及患有恶性胸腔积液患兔，最终治疗组剩余24只，对照组剩余20只，符合实验要求，可用于结果统计。

1.3 统计学分析

采用SPSS 20.0软件进行数据统计，计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺癌兔模型 5次穿刺后不同部位肿瘤细胞转移阳性率的比较

治疗组中，3个不同部位5次穿刺均未发现阳性转移的发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；对照组中，脏层胸膜5次穿刺均未发现阳性转移的发生率分别低于壁层胸膜和胸壁组织，差异均有统计学意义（χ2=4.286、6.144，P=0.038、0.013）；治疗组脏层胸膜5次穿刺均未发现阳性转移的发生率高于对照组，差异有统计学意义（χ2=4.207，P=0.040）。（表1）

表1 两组肺癌兔模型 5次穿刺后不同部位肿瘤细胞转移阳性率的比较[ n（%）]

2.2 穿刺后肺癌兔模型不同部位肿瘤细胞转移阳性率的比较

肺癌兔经5次穿刺后，治疗组脏层胸膜肿瘤细胞转移阳性率明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；两组壁层胸膜及胸壁组织的肿瘤细胞转移阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。（表2）

表2 穿刺后两组肺癌兔模型不同部位肿瘤细胞转移阳性率的比较[ n（%）]

3 讨论

FNAC是利用细针穿刺病灶，通过吸取少许的细胞成分进行涂片检查的细胞学诊断方法。FNAC在国外已经发展了80多年，在中国也有近60年的历史。近年来，随着CT、B超等先进检查定位手段的引进以及针吸活检设备的进步，应用经皮肺FNAC检查诊断恶性肿瘤已在临床得到广泛开展[7‐8]。它具有简便、安全、准确、迅速和经济等特点，已成为各国普遍接受的诊断方法。但是经皮肺FNAC检查存在一个严重的弊端，即会引起肿瘤细胞的转移扩散[9‐10]。为了解决这个问题，本研究设计了上述动物实验，以探究FNAC后使用化疗药物是否可降低肿瘤细胞沿针道转移阳性率。

肺癌兔模型不同部位肿瘤细胞转移阳性率比较结果显示，治疗组中，3个不同部位5次穿刺均未发现阳性转移的发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；对照组中，脏层胸膜5次穿刺均未发现阳性转移的发生率分别低于壁层胸膜和胸壁组织，差异均有统计学意义（P＜0.05）；治疗组脏层胸膜5次穿刺均未发现阳性转移的发生率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组所有肺癌兔模型5次穿刺后不同部位肿瘤细胞转移阳性率比较结果显示，治疗组脏层胸膜肿瘤细胞转移阳性率明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；两组壁层胸膜及胸壁组织的肿瘤细胞转移阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

由实验结论可知，在给肺癌兔进行经皮肺FNAC检查后，无论是治疗组还是对照组，脏层胸膜肿瘤细胞转移阳性率均最高，而壁层胸膜和胸壁组织肿瘤细胞转移阳性率较低，这说明随着穿刺细针所经过的组织距离病灶渐远，穿刺针上所携带的肿瘤细胞定植的概率就越低，肿瘤细胞沿针道转移扩散的概率越低；而壁层胸膜和胸壁组织的肿瘤细胞阳性转移率没有明显差异，这可能是由于携带肿瘤细胞的穿刺针在经过壁层胸膜后，穿刺针上残余的肿瘤细胞被血液循环或者淋巴组织等免疫系统识别后杀灭，抑制了肿瘤细胞的转移。另外，治疗组脏层胸膜肿瘤细胞阳性转移率明显低于对照组，说明皮肺穿刺后使用化疗药物可有效杀死针道的肿瘤细胞，降低阳性转移率。综上所述，经皮肺穿刺后，局部使用化疗药物能够有效降低肿瘤细胞沿针道转移阳性率。因此，建议今后在临床上在对肿瘤患者进行FNAC前，应采取有效的预防措施，术后应积极采取化疗方法，以此降低肿瘤细胞转移阳性率。