徐雯 曹弋 吴剑英

摘 要 目的：建立合适的交联透明质酸钠微生物限度检查方法及控制菌检查方法，并进行方法学验证研究。方法：在前期摸索的提高稀释倍数方法的基础上，依据《中国药典》2015版采用滤纸过滤加薄膜过滤法对交联透明质酸钠进行微生物限度检测。结果：需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数检查试验中5种测试菌的回收率均在0.5～2.0之间，符合规定。结论：该检查方法操作方便，结果准确可靠，适用于交联透明质酸钠的微生物限度检测。

关键词 交联透明质酸钠 微生物限度 薄膜过滤法

中图分类号：R917 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2020）13-0070-03

Validation of microbial limit test method for cross-linked sodium hyaluronate

XU Wen1*， CAO Yi1， WU Jianying2**

（1. Shanghai Jianhua Fine Biological Products Co.， Ltd.， Shanghai 200231， China； 2. Shanghai Haohai Biological Technology Co.， Ltd.， Shanghai 201613， China）

ABSTRACT Objective： To establish a microbial limit detection method for cross-linked sodium hyaluronate and verify the methodology to ensure its applicability. Methods： According to the 2015 edition of the Chinese Pharmacopoeia， the total number of aerobic bacteria， molds and yeasts in cross-linked sodium hyaluronate was tested by membrane filtration method. Results： The recovery rates of the five test microoganims were in the range of 0.5 to 2.0， which were in compliance with the regulations. Conclusion： The method is accurate， reliable， easy to be operated and suitable for the detection of microbial limit of cross-linked sodium hyaluronate.

KEy WORDS cross-linked sodium hyaluronate； microbial limit； membrane filtration method

透明质酸是一种多功能基质，广泛分布于人体各部位。其凝胶制剂广泛应用于眼科黏弹性保护剂、骨科功能改善剂、外科防粘连保护剂、组织填充剂（如整形外科）等领域，在临床已应用十多年，其安全性及有效性得到了医学各界普遍认可[1-2]。天然透明质酸钠用于关节腔注射治疗骨关节炎（OA）患者时，其在体内半衰期仅为1～2 d，关节腔存留时间过短限制了其作用的发挥。利用其分子中的羟基、羧基、Ⅳ-乙酰氨基和还原末端与不同的交联剂反应可得到不同类型的交联透明质酸钠凝胶产品，不仅可以保留原有的生物相容性、细胞黏附能力，而且具有更好的流变性能，机械强度和较高稳定性，延长其在体内的存留时间[3]。

在交联透明质酸钠凝胶产品的开发过程中，通过透明质酸钠干粉和交联剂进行交联反应后制备得到交联透明质酸钠凝胶中间品，在成为最终产品前应对中间品的微生物污染状况进行控制。……