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鸭大肠杆菌O78血清型强毒株分离鉴定及其高密度发酵新工艺

2020-07-21龚凤平马海彬罗梦萍王贵平袁建丰广东海大畜牧兽医研究院广东广州511400

中国兽医学报 2020年6期

龚凤平,马海彬,罗梦萍,王贵平,袁建丰 (广东海大畜牧兽医研究院,广东 广州 511400)

鸭大肠杆菌病由致病性大肠杆菌(Escherichiacoli,E.coli)引起,病型表现为大肠杆菌性败血症、大肠杆菌性生殖器官病、肉芽肿、腹膜炎、脐炎、眼炎、脑炎等,其中以败血症大肠杆菌病最常见[1]。E.coli为革兰阴性短棒状杆菌,麦康凯琼脂平板上菌落呈粉红色,结合细菌形态以及培养特性,依据E.coli持家基因PhoAPCR检测可进行鸭E.coli分离鉴定[2-3]。E.coli呈全球性分布,血清型复杂多样,在禽类中最常见的血清型是O1、O2、O35和O78[4]。据国内不同地区血清型调查数据分析,禽E.coli在全国范围内O78血清型分布广泛,且为大多数省市的优势血清型[1,5-9]。

普遍认为,大肠杆菌病是养禽业最广泛存在的感染性细菌病。由于临床上广泛使用抗生素,导致大量耐药菌株的产生,因此,在E.coli防制中,除了改善饲养管理程序之外,疫苗免疫是更为有效的预防途径。一般情况E.coli灭活疫苗对同源血清型可产生保护力,而对异源血清型不会产生较大的交叉保护[4],因此,使用分布广泛的优势血清型制备疫苗免疫接种鸭群更具有可行性。

对于细菌疫苗,如何提高细菌菌数(即抗原含量)是细菌疫苗研究的关键技术之一,细菌高密度发酵技术业已成为细菌疫苗制备中常用的培养技术手段。致病性E.coli为兼性厌氧菌,对培养条件要求不高,在普通的LB肉汤培养基中均能正常生长,然而难以实现其高密度发酵,致病性鸭E.coli高密度发酵更是鲜有报道。

本研究通过从病料中分离鉴定鸭E.coli,利用O抗原定型单因子血清筛选O78血清型菌株,并对其进行毒力分析,获取1株鸭大肠杆菌O78血清型强毒株。……

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