郑 祥 王 审

心肌缺血损伤是冠心病主要病理表现，临床上常用硝酸酯类、β 受体阻滞剂及他汀类药物治疗冠心病，但长期使用会导致严重副作用[1]。桃红四物汤（TST）广泛应用于高血压、心绞痛等心血管疾病治疗[2]。临床研究表明，桃红四物汤可减轻冠心病临床症状，提高患者生活质量[3]。减小脑缺血损伤梗死面积，发挥保护作用[4]。心肌缺血性损伤导致心肌细胞凋亡，抑制凋亡显著改善心血管疾病症状[5]。自噬通过降解受损蛋白质或冗余细胞器维持细胞稳态，介导细胞凋亡过程，与心血管疾病病理过程有关[6-7]。缺血条件下激活心肌细胞自噬，可减轻缺血损伤[3]。研究发现，桃红四物汤成分当归可激活自噬[8]。本研究探讨桃红四物汤对心肌缺血的保护作用及其机制，报道如下。

1 实验材料

1.1 细 胞 H9C2 心肌细胞（ATCC，#FS-0056），购自上海研生生化试剂有限公司。

1.2 动 物 实验清洁级健康雄性SD 大鼠12 只，体质量（220±20）g，浙江中医药大学动物实验中心提供，实验动物许可证号∶SYXK（浙）2018-0012，动物伦理审批号2018111，动物饲养及实验操作严格遵守实验动物的使用和管理原则。

1.3 试 剂 抗体∶微管相关蛋白轻链3Ⅱ/3Ⅰ（LC3-Ⅱ/Ⅰ，批号12741）、核孔糖蛋白62（p62，批号16177）、B-细胞淋巴瘤因子2 相关X 蛋白（Bax，批号2772）、B-细胞淋巴瘤因子2（Bcl-2，批号15071）和甘油醛酸3-磷酸脱氢酶（GAPDH，批号5174）抗体，购自美国Cell Signaling Technology 公司；试剂∶四唑盐（MTT）试剂盒（InvitrogenTM，批号V13154），Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒（InvitrogenTM，批号V13242），PVDF 膜（InvitrogenTM，批号IB401002），购自美国Thermo Fisher Scientific 公司。

2 实验方法

2.1 TST 制备 TST∶桃仁、红花、熟地黄、当归、川芎、白芍（购自北京同仁堂浙江中药材有限公司）各15g，加水450mL（按每克生药加水5mL），浸泡……