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柞蚕雌蛾女性功能食品大鼠30天喂养试验研究

2020-07-06邵长波孙继红刘隽彦

北方蚕业 2020年2期
关键词:血液学柞蚕脏器

钱 琨 邵长波 周 影 孙继红 刘隽彦

(吉林省蚕业科学研究院,吉林吉林 132012)

柞蚕雌蛾女性功能食品是以柞蚕雌蛾为主要原料,配以茯苓、葛根等中药材研制而成。研究表明,柞蚕雌蛾具有镇静安眠的作用,对内分泌失调引起的女性更年期综合征有较好的缓解作用。但是其形态复杂,不便于直接食用,将其开发成功能食品将弥补这一不足。然而,在食品或功能食品的开发研究中,产品的安全性是第一要素。因此,依据食品安全国家标准GB15193.13-2003《30天和90天喂养试验》,在对本产品进行急性毒性试验证明安全之后进一步做短期(30天喂养)试验,以明确产品在短期内对大鼠生长发育的影响[1-6]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验样本

柞蚕雌蛾女性功能食品,自制。临用时用蒸馏水配制成溶液给大鼠灌胃。

1.1.2 实验动物

选用健康、成年、雌性SD大白鼠80只,月龄2 ~ 3月,体重250 ~ 300 g。

1.2 方法

取雌性大鼠80只,适应性饲养观察5 d后按体重分为空白对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组20只。灌胃给药,剂量分别为每天0 g/kg、3 g/kg、6 g/kg、12 g/kg。给药容积均为每百克体重3 mL。连续给药30 d,每天2次。试验前以及试验期间每周称量大鼠体重1次并记录。大鼠在给药期间自由饮食饮水,恢复期停止给药,自由饮食饮水,继续饲养15 d,处死前12 h禁食。麻醉状态下经腹主动脉取血,称定相关组织器官质量并进行病理学检验。

1.2.1 观察指标

1.2.1.1 一般表现

每天观察外观、行为、分泌物、粪便、摄食、饮水状况及体重增长情况,如有异常予以记录。试验前及给药后每周定期称量大鼠体重、饮水量及进食量,并与对照组比较。

1.2.1.2 脏器及系数

分别于给药30 d和停药15 d后将大鼠麻醉,经腹主动脉取血后进行系统尸体解剖,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺、胸腺、大脑、子宫、卵巢等脏器进行称量,并计算脏器系数(脏器系数=脏器质量/体重×100%)。

1.2.1.3 血液学指标

分别于给药30 d和停药15 d后检测:白细胞数目(WBC)、淋巴细胞数目(Ly)、中间细胞数目(Mid)、粒细胞数目(Gran)、淋巴细胞百分比(Ly%)、中间细胞百分比Mid%)、粒细胞百分比(Gran%)、红细胞数目(RBC)、血红蛋白(Hgb)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、红细胞分布宽度(RDW)、红细胞压积(HCT)、血小板数目(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)和血小板压积(PCT)等指标。

1.2.1.4 血液生化学指标

分别于给药30 d和停药15 d后检测:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(T-Bil)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、球蛋白(GLO)、尿素氮(Urea)、肌酐(Grea)、血糖(Glu)和总胆固醇(T-CHO)等。

1.2.1.5 组织病理学

分别于给药30 d和停药15 d后将大鼠麻醉,经腹主动脉取血后进行系统尸体解剖,摘取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺、胃、胸腺、大脑、淋巴结(肠系膜)、子宫、卵巢等主要脏器,分别取材后以10%中性甲醛固定,做组织病理学检查。

1.2.2 数据统计

以上试验数据均作统计学t检验处理。采用SPSS13.0数理统计软件进行组间比较单因素方差分析。

表1 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠体重的影响(±S)

2 结 果

2.1 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠一般表现的影响

经给药30天及恢复期的观察,各组大鼠的状态良好,活动自如,皮毛光亮,进食、饮水、排便与对照组比较均无异常。柞蚕雌蛾女性保健食品3个剂量组的大鼠的初始体重、增重、终体重与对照组相比均无显著性差异(P>0.05),详见表1。

2.2 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠脏器系数的影响

给药30天及恢复期喂养试验表明,柞蚕雌蛾女性保健食品3个剂量给药组的脏器系数与对照组大鼠相比无显著性差异(P>0.05),详见表2。

2.3 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠血液学的影响

给药30 d和停药15 d后对大鼠进行血液学检查,结果表明:柞蚕雌蛾女性保健食品3个剂量给药组的各项血液学指标与对照组相比,均无显著性差异(P>0.05),详见表3。

表3-2 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠血液学的影响(±S)

续表3-2 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠血液学的影响(±S)

2.4 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠血液生化指标的影响

给药30 d和停药15 d后对大鼠进行血液生化学检查,结果表明:柞蚕雌蛾女性保健食品3个剂量给药组的各项血液生化指标与对照组相比,均无显著性差异(P>0.05),详见表4。

表4 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠血液生化学的影响(±S)

2.5 柞蚕雌蛾女性保健食品对大鼠组织病理的影响

通过切片观察:30 d给药组和恢复期组的大鼠的组织器官形态结构与空白对照组无明显差别,没有明显的病理性改变。详见病理图片(图1-2)。

图1、图2显示,高剂量组小鼠的心脏、肝脏、脾、肺、肾、肾上腺、胃、胸腺、脑、淋巴结等与对照组比较末见改变,其组织结构未见异常。观察子宫与卵巢的组织切片,可见子宫由大量平滑肌及少量间质组成,肌层内可偶见子宫腺体和散在的嗜酸性粒细胞,未见出血和坏死;卵巢表面为单层扁平或立方形上皮,卵巢实质为结缔组织及各级卵泡,均为正常组织结构。

3 结 论

经过30天雌性大鼠喂养试验和恢复期观察发现,柞蚕雌蛾女性功能食品各剂量组的大鼠外观特征、体重增长、血液学和血液生化学的各项指标以及脏器系数与对照组相比均无显著性差异;主要脏器的组织病理学检查也未见明显的规律性的病理改变,说明该药对大鼠各脏器没有明显的毒性作用,由此推断柞蚕雌蛾女性功能食品人用也较为安全。

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