胡英婕

(锦州医科大学医疗学院，辽宁 锦州 121000)

红景天是《中国药典》一部收录的中药材，具有益气活血，通脉平喘功效，用于气虚血淤，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘等症[1]。近年来国内外的药学工作者对红景天进行了深入的研究，提出了红景天具有类似人参“扶正固本”的“适应原样”的作用，而且在某些方面还优于人参，没有人参兴奋作用过强的不足。红景天所含有效成分具有强心镇静、调节新陈代谢、调节神经系统和内分泌系统双向调节血糖、血压的作用，用于治疗脑血管疾病，老年性心肌能衰竭、糖尿病、低血压等症，也用于病后体虚、年老体弱、神经乏力等[2]。

现代药理研究表明，山萘酚为黄酮类化合物,具有抗癌、抗氧化、抗病毒、抗炎、抗菌、增强机体免疫等多种药理作用，是红景天主要有效成分之一[3]。《中国药典一部》(2015版)红景天质量标准中有红景天苷的薄层色谱鉴别，而没有山萘酚的鉴别。本研究根据相关文献[4-6]，建立红景天中有效成分山萘酚的薄层色谱鉴别方法，对完善中药材红景天的质量标准及其他药材中含有山萘酚成分的鉴别提供借鉴。

1 材料

KQ-100A 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，FA2004N电子天平(上海精密仪器公司)，HH-S恒温水浴锅(江苏医疗仪器厂)，山萘酚对照品(购自中国食品药品检定研究院)，甲醇、盐酸，环己烷、乙酸乙酯、甲酸、乙醇、三氯甲烷、丙酮为分析纯。红景天药材，经辽宁锦州大德堂药店王景山执业药师鉴定为正品。

2 方法

2.1 山萘酚对照品溶液的制备

取山萘酚对照品2mg，用甲醇配制成浓度为1mg/mL的对照品溶液。

2.2 山萘酚供试品溶液制备方法考察

(1)取本品粉末(过三号筛)约0.5g，用甲醇-盐酸混合液(甲醇终浓度50%，盐酸终浓度2.0mol/L)于90℃水浴回流水解1h。

(2)用醋酸乙酯浸泡一夜，第二日在恒温水浴锅(35℃)加热回流1h。

(3)用60%乙醇水溶液，料液比1∶15混合，超声波提取，超声波功率：100W，超声频率：35赫兹，提取方式：间隔2min超声作用一次，超声时间5min，总提取时间28min，提取温度35℃。

2.3 展开系统的筛选

Ⅰ 三氯甲烷-甲醇-丙酮-水(6∶3∶1∶1)的下层溶液

Ⅱ 三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)于5-10℃放置12h的下层溶液

Ⅲ 环己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)

2.4 山萘酚供试品溶液制备方法和展开系统的优选

用供试品溶液制备方法2和3制备的供试液，分别用3个展开系统展开后，斑点模糊一片，说明制备方法2和3分离效果不好。用供试品溶液制备方法1制得的供试液，用展开系统Ⅰ展开后，Rf值为0.2；用展开系统Ⅱ展开后，展开时间过长；而用展开系统Ⅲ展开后，Rf值为0.4，斑点清晰，圆整，重现性也好。因此，采用供试品溶液制备方法1制得的供试液，用展开系统Ⅲ展开。

2.5 薄层色谱鉴别检测限的确定

取山萘酚对照品溶液(1mg/mL)0.5,1,1.5,2,2.5,3μL分别点于同一硅胶G薄层板上，按照薄层色谱鉴别方法操作，结果自1μL起，可见到明显斑点，故山萘酚的最小检出量为1μg。

3 结果

取三种不同产地(黑龙江、宁夏、四川)红景天药材，分别制成供试品溶液。取硅胶G薄层板，105℃活化后，吸取对照品溶液和3种供试品溶液各2μL,以环己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)为展开剂，展开，展距约为10cm，取出，晾干。喷以5%AlCl3乙醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上出现相同的斑点(见照片1)。本方法可将山萘酚与其他成分较好的分离，而且鉴别的灵敏度较高，专属性好。

照片1

1.山萘酚对照品;2.供试液(红景天药材产地：黑龙江) ;3.供试液(红景天药材产地：宁夏);4.供试液(红景天药材产地：四川)

4 讨论

(1)提取方法的考察 首先对回流提取法、超声提取法和酸水解提取进行了比较，结果回流提取和超声提取所得供试品溶液提取效果差，经展开剂展开后，均未呈现清晰、圆整的斑点。实验证明酸水解法提取效果好，斑点圆整、清晰。

(2)因山萘酚含有酚羟基，显酸性，展开系统中加入少量甲酸，能有效控制主斑点不扩散，保持斑点更为圆整，实验证明展开系统中加入少许甲酸展开效果更好。