韩晓静，林 牧，陶 雪，龚亚东，唐 竹，陈云华，马庆庆

(贵州航天医院中心实验室，贵州 遵义 563000)

结核病(tuberculosis，TB)是由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculoss，MTB)感染引起的慢性传染病[1]，已成为全球单因致死率最高的传染病[2]。近年致死率极高的耐药结核患者不断增多，与早期诊断及防控的薄弱和不足等原因密切相关。目前罗氏培养+药敏试验是检测MTB耐药的金标准，但存在周期长、准确性较低、灵敏度差等缺点[3-4]，远不能满足临床需要。随着MTB耐药分子机制研究的深入，目前已明确MTB的rpoB、inhA、katG、rpsL、embB等基因突变与结核耐药有关[5-8]。基因芯片技术具有快速、准确率高、重复性好、通量高等特点，可应用于MTB耐药基因的检测[7-8]。本研究应用PCR-反向点杂交技术(膜芯片技术)对MTB与利福平(rifampicin，RFP)、异烟肼(isoniazid，INH)、链霉素(streptomycin，SM)和乙胺丁醇(ethambutol，EMB)耐药相关的突变基因进行检测，与药敏培养比例法检测结果进行分析对比，探讨PCR-反向点杂交法(膜芯片法)在MTB耐药快速检测中的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般材料：选取2017年11月～2018年11月间在我院就诊的441例菌阳性肺结核患者，其中男276例，女165例，年龄13～88岁，平均(41.25±5.56)岁。纳入病例均符合中华医学会结核病学会《肺结核诊断和治疗指南》、《临床诊疗手册(结核病分册)》、《结核病防治手册(菌阳肺结核诊断标准)》中的诊断标准，性别、年龄随机分布。排除标准：①合并肿瘤、高血压、糖尿病、自身免疫性疾病及服用免疫抑制药物的患者；②孕妇或哺乳期妇女；③HBV、HCV、HIV 感染者或(和)AIDS 患者。

1.2主要仪器设备：分枝杆菌核酸检测试剂盒(北京博奥，中国)，结核分枝杆菌耐药突变基因检测试剂盒(PCR-反向点杂交法，深圳亚能)，YN-H16型恒温杂交仪(深圳亚能)，2720 Thermal Cycler PCR仪(ABI)等。……