杨 静，霍玉青

(滨州医学院附属医院肿瘤科，山东 滨州 256600)

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，严重威胁着妇女的健康。在常见恶性肿瘤中宫颈癌的发病率位居第三位，在妇科恶性肿瘤中其死亡率位居第四位。据全球范围统计，每年约有47.1万新发病例，21.5万死亡病例。我国每十万妇女中有12.96人患宫颈癌，3.28人死于宫颈癌[1]。80%的宫颈癌发生在发展中国家，且发病年龄年轻化给妇女健康带来严重影响。

蛋白质泛素化是一个可逆的过程。一些蛋白质家族具有去泛素化的活性，其中包括卵巢肿瘤蛋白酶(OTU)家族、泛素特异蛋白酶(USP)家族和泛素C端水解酶(UCH)家族等[2]。OTUD5(OTU domain-containing protein 5 )属于含有OTU结构域的半胱氨酸蛋白酶超家族。OUT结构域能介导去泛素化酶活性，OTUD5能通过去除的K63多聚泛素链泛素化抑制I型干扰素的产生[3]。但目前其在宫颈癌中的表达及意义尚不明确。

1 资料与方法

1.1临床标本免疫组化检测及结果判定：收集60例行根治性手术治疗的宫颈癌患者病理标本，所有标本均经病理学证实。兔抗人OTUD5单克隆抗体购于Novus公司。过氧化酶标记的链酶卵白素(streptavidin-perosidase，SP)免疫组化染色试剂盒购自武汉博士德公司。采用半定量积分法判断阳性结果，以出现棕色颗粒作为阳性标准。将“-”定义为阴性表达，“+”及“++”定义为低表达，“+++”定义为高表达。低表达和高表达为阳性表达。

1.2细胞和试剂：使用TRIzol试剂(Invitrogen，Carlsbad，CA，USA)从组织中分离总RNA。 使用转录物第一链cDNA合成试剂盒(Roche，Mannheim，Germany)合成cDNA。 实时PCR由Faststart Universal SYBR Green Master(Roche)进行。OTUD5正向物：GAAGTAGATGTGGCACCATT，反向引物：CATTCCCACCACAGAAGACC。

1.3细胞和试剂：宫颈癌Hela细胞系购自中国科学院上海细胞库，使用低糖DMEM加10%胎牛血清( FBS)进行细胞培养、传代、冻存等，用于实验的细胞无支原体污染，状态良好。……