陈财铭 李艺虾 林佳群 万建新

350005 福州，福建医科大学附属第一医院肾内科

肾小球滤过屏障由内皮细胞、肾小球基底膜和脏层上皮细胞(足细胞)组成，其中足细胞的作用至关重要。有研究表明蛋白尿与足细胞受损密切相关[1]。本文建立以足细胞损伤为主的阿霉素肾病模型，用新型免疫抑制剂他克莫司进行干预处理，探讨他克莫司对足细胞损伤的修复作用，从而为足细胞病治疗提供新的实验依据。

材料和方法

一、实验动物与试剂

清洁级雄性SD大鼠，2月龄，体质量180～200 g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，喂养于福建医科大学实验动物中心SPF级环境。阿霉素(深圳万乐药业)，他克莫司(安斯泰来制药有限公司)，TUNEL试剂盒(罗氏公司)，兔抗WT-1多克隆一抗(Abcam公司)，兔抗nephrin多克隆一抗(Abcam公司)，兔抗p38多克隆一抗(Santa cruz公司)，兔抗caspase-3多克隆一抗(Merk Millipore公司)，山羊抗兔IgG二抗(北京中杉金桥公司)，山羊抗兔辣根过氧化物酶标记二抗(北京中杉金桥公司)，Alexa Fluor594标记山羊抗兔IgG(北京中杉金桥公司)。

二、方法

1.分组 健康雄性SD大鼠，标准饲料喂养，自由进食和饮水，普通光照，适应性饲养2周。将24只SD大鼠随机分成3组(每组各8只)。对照组：不进行阿霉素尾静脉注射，也不给予他克莫司灌胃处理，仅以等量生理盐水尾静脉注射和灌胃；模型组：于实验第1天尾静脉注射阿霉素4 mg/kg，间隔1周，即第7天给予第二次尾静脉注射阿霉素3.5 mg/kg，并以等量生理盐水灌胃；他克莫司组：与模型组相同的方法进行阿霉素尾静脉注射，并在第一次尾静脉注射阿霉素后同日给予他克莫司进行灌胃，剂量为0.5 mg·kg-1·d-1。……