一种高灵敏及高选择性荧光“关-开”分析测定谷胱甘肽的方法研究
2020-06-07覃小宁凌芊芊梁淑彩鄢国平
覃小宁, 秦 蒙, 凌芊芊, 梁淑彩*, 鄢国平
(1.武汉大学药学院,湖北武汉 430072;2.武汉工程大学材料科学与工程学院,湖北武汉 430074)
谷胱甘肽(GSH)是一种重要的低分子量巯基化合物,它在细胞内发挥着不可替代的作用,如保持细胞免疫系统的正常功能,维持细胞内的氧化还原平衡和解毒等[1]。此外,GSH在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品或药品中也较多应用[2,3]。因此,对于生物样品、食品、药品等样品中GSH的检测有重要意义。已有的巯基化合物测定方法有光谱分析法[4 - 6]、液相色谱分析法[7],高效毛细管电泳法[8],电化学分析法[9,10]等。其中荧光分析法具有简便、成本低、灵敏度高的优点而受到关注[4 - 6,11]。然而,尽管已有很多巯基荧光探针的报道,但它们大多数用于荧光分析测定样品中巯基的总量,在进行GSH测定时,易受到其结构类似物半胱氨酸(Cys)及高半胱氨酸(HCy)的干扰。近年来,对于具有GSH选择性的荧光探针研究开始受到关注[12,13],如已有基于GSH与金属离子的选择性相互作用而开发的GSH探针[14]。
萘酰亚胺类化合物是一类重要的荧光染料,已较多用于荧光探针的研究[15]。4-硝基-N-丁基-1,8-萘酰亚胺(BNNA)是一个简单的萘酰亚胺衍生物,广泛用于萘酰亚胺类化合物的合成[16,17]。由于具有受体-π-受体电子结构,其中的-NO2易发生亲核取代反应,有望用于巯基化合物的测定。本文研究了BNNA与GSH、Cys和HCy等巯基化合物以及其他非巯基氨基酸反应前后的荧光光谱,发现BNNA无荧光,GSH能使其荧光显著增强,而Cys、HCy和其他非巯基氨基酸对BNNA的荧光没有或仅有弱的影响。……
