吕 妍， 贾少杰， 戴好富， 解修超， 曾艳波

(1.陕西理工大学 生物科学与工程学院， 陕西 汉中 723000；2.海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室， 海南 海口 571101；3.中国热带农业科学院 热带生物技术研究所， 海南 海口 571101)

植物内生真菌是指在植物寄主中度过全部或近乎全部生活周期而不使寄主表现任何症状的一类真菌[1]。近年来人们对它的研究逐渐深入。植物内生真菌代谢产生结构新颖、生物活性较好的化合物总数远高于土壤微生物[2]，这主要是因为植物内生真菌种类和数量多、生存环境多样化。它的次生代谢产物普遍具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤以及抗心血管疾病等活性[3]。1929年，从青霉属(Penicillium)真菌中分离出对多种病原菌具有极强抑制作用的化合物青霉素开始，人们对青霉属真菌的研究从未停止。青霉属是一类主要营腐生生活的较为多样和常见的真菌[4]。目前，从青霉属真菌中已经分离出1300种不同的代谢产物[5]。本研究是从青霉属植物内生真菌Penicilliumtropicum(KU641695)中分离纯化出5个化合物，鉴定其结构，并对抑菌活性进行测试。

1 实验器材

1.1 实验仪器、试剂

核磁共振仪Bruker AV-500 (Bruker,German)；柱层析硅胶(Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.)；薄层层析硅胶板GF254(Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.)；20～45 μm ODS(Fuji Silysia Chemical Co.,Ltd.)；Sephadext LH-20(Merck Co.Ltd.)；薄层层析硅胶H(Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.)；马铃薯葡糖液体培养基(马铃薯200.0 g、葡萄糖20.0 g、pH自然)；大米固体发酵培养基(大米100.0 g、水150.0 mL、pH自然)；实验所用试剂均为市售分析纯。

1.2 实验菌株

植物内生真菌Penicilliumtropicum分离自植物Sapiumellipticum的新鲜叶片、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)。现保藏于中国热带农业科学院热带生物技术研究所B502室。

2 实验方法

2.1 内生真菌的发酵

以大米固体培养基对目标菌种进行大规模发酵培养。……