1株鸭3型腺病毒的分离鉴定及fiber基因序列分析
2020-05-21严专强曾凡桂招丽婵王占新鲁俊鹏
严专强 曾凡桂 招丽婵 王占新 鲁俊鹏*
1.温氏食品集团股份有限公司,广东新兴527400;2.广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室,广东新兴527400
腺病毒(Adenovirus,ADV)为线状双股DNA 病毒,无囊膜,直径70~110 nm,呈二十面体对称。腺病毒粒子由252 个壳粒组成,包含240 个不在顶点的壳粒(六邻体)和12 个顶点壳粒(五邻体)。每个五邻体基底带有1~2 根被称为纤丝的纤突(fiber),纤丝的长度与病毒的抗原性相关。感染禽类的腺病毒主要有3 个群,I 群代表株是鸡胚致死性孤儿病毒,目前从鸡分离到12 个血清型,火鸡2 个血清型,鹅4 个血清型,鸭2 个血清型;Ⅱ群主要包括火鸡出血性肠炎病毒、大理石脾病毒和鸡大脾病病毒;Ⅲ群与减蛋综合征相关,目前只包含一个成员,即减蛋综合征病毒[1-2]。
鸭l 型腺病毒是与减蛋综合症相关的Ⅲ群腺病毒,鸭2 型腺病毒于1977年从法国番鸭中分离,该病毒抗原与已知的腺病毒不同,是一种新型的禽腺病毒[3]。2014年奥地利科学家Marek 等通过高通量测序技术获得该病毒全序列,该型病毒被正式命名[4]。鸭3 型腺病毒于2014年在我国首次分离,该病毒hexon基因推导的氨基酸序列与鸭2 型腺病毒GR 株同源性仅为60%,且该病毒含有2 个fiber 基因(fiber-1 和fiber-2),而GR 株只含有1 个[5]。为了解鸭3 型腺病毒的流行与变异情况,本研究对近期广东地区分离的毒株进行了主要免疫原性相关基因序列测定和分析,以期为该病的防治提供参考。
1 材料与方法
1.1 主要材料和试剂
13日胚龄番鸭胚由温氏食品集团股份有限公司提供;ExTaq 酶、DL 2000 DNA Marker、Prime-Script One Step RT-PCR Kit、pMD-19 T 载体等购自TaKaRa 公司;……
