腹部推拿联合5-HT4受体激动剂调节SCF/c-kit信号通路对STC大鼠的作用研究
2020-05-21马鑫文王程张瑞春屈玉疆刘俊昌
马鑫文,王程,张瑞春,屈玉疆,刘俊昌
慢传输型便秘(slow transit constipation, STC)是由于大肠功能紊乱、传导失常而导致的排便周期延长和排便困难。其发病机制可能与肠神经系统、中枢神经及自主神经系统调节功能障碍、激素水平异常等多种因素有关[1-6]。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT) 是参与调节胃肠道分泌和运动功能的重要神经递质和旁分泌信号分子。其中 5-HT3受体(5-HT3R)、5-HT4受体(5-HT4R)与胃肠道动力存在紧密联系。莫沙必利是目前临床上常使用的 5-HT4受体激动剂之一,常被用来调节胃肠道动力,促进肠道蠕动。腹部推拿是中医特色疗法之一,近年研究表明,腹部推拿能够明显改善慢传输型便秘的临床症状,缓解患者的疾病状态[3-6],但其作用机制目前尚未明确。现通过研究腹部推拿联合5-HT4受体激动剂对STC大鼠进行治疗并观察疗效,报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 (1)动物:健康雄性SD大鼠65只, SPF级,6周龄,体质量(180±20)g,购自新疆医科大学动物实验中心,自由进食、饮水饲养于实验动物房。(2)试药试剂:SCF、c-kit和GAPDH抗体均购自Proteintech公司,RNA提取试剂盒购自Promega公司,RIPA蛋白裂解液、P物质(SP)、一氧化氮(NO)、5-HT及血管活性肠肽(VIP)检测ELISA 试剂盒购自上海碧云天公司,ECL显色液购自Thermo公司。(3)仪器设备:酶标仪(MB-530)购自济南好来宝医疗器材有限公司,双垂直电泳仪(DYCZ-25D)、转印电泳仪(DYCZ-40G)购自北京六一仪器有限公司,凝胶成像仪(Gel Doc XR)购自伯乐生命医学产品有限公司,离心机(FC5718 230V)购自奥豪斯国际贸易(上海)有限公司。
1.2 STC大鼠模型的建立 2017年10月—2018年6月于新疆维吾尔自治区中医药研究院进行实验。65只大鼠随机数字表法分为5组:对照组、模型组、推拿组、莫沙必利组、推拿联合莫沙必利组(联合组),每组13只。……
