杨德翠,徐 青,赵方贵,柳 冕,刘 新

(1.青岛农业大学 生命科学学院,山东省高校植物生物技术重点实验室,山东 青岛 266109； 2.武汉海稻国际生物科技有限公司,湖北 武汉 430000)

盐胁迫对植物氮代谢的影响在分子水平上也初步进行研究,Lü 等[10]研究了鳗草在NaCl胁迫下的转录组,发现盐胁迫后鳗草的NR、NiR基因表达显著上调。相比盐胁迫下氮代谢酶活性的研究,氮代谢相关基因在盐胁迫后的表达变化报道较少。

水稻是重要的粮食作物,盐胁迫下氮代谢调节机制将对整个生命活动起到重要作用,但盐胁迫下氮代谢整个过程的研究还不够系统、深入,特别是不同抗性品种氮代谢相关基因在盐胁迫下差异表达有待研究。

1 材料和方法

1.1 试验材料及培养

1.1.1 试验材料 试验选用抗性粳稻(Oryzasativasubsp. Keng)品种东稻4号以及盐敏感品种日本晴(OryzasativaL.spp.japonica)。

将水稻种子用0.1%的HgCl2消毒10 min,用蒸馏水冲洗3～4次,于蒸馏水中浸泡12 h,然后将种子置于培养皿中,在28 °C恒温培养箱中催芽萌发。

将萌发后种子置于96孔板中进行水培,培养液为1/4 Hoagland营养液(pH值6.0),光周期/黑暗为14 h/10 h,温度29 ℃/25 ℃。培养12 d后进行盐胁迫处理。

1.1.2 试验材料的处理 青岛农业大学植物生理实验室前期试验表明,在0.3%的NaCl胁迫下2个水稻品种有显著差异,因此,盐处理液用1/4 Hoagland营养液配制成0.3%的NaCl溶液,对照组为1/4 Hoagland营养液。每天更换一次培养液。处理24 h,取根和叶用于基因的检测；4 d后,对水稻幼苗叶和根进行取样,用于相关生理指标的测定,所取材料保存于-80 ℃超低温冰箱中。

1.2 试验方法

1.2.1 氮相关物质含量的测定 铵态氮含量测定采用茚三酮显色法[11],硝态氮含量测定采用水杨酸-硫酸显色法[12]。……