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芳香新塔花对动脉粥样硬化模型小鼠Toll 样受体-4/核因子-κB 信号通路的影响

2020-04-27张华马学宽王思静张选明倪昀王丽安冬青

中国循环杂志 2020年4期
关键词:小鼠剂量模型

张华,马学宽,王思静,张选明,倪昀,王丽,安冬青

芳香新塔花(新塔花)为唇形科半灌木状植物新塔花的地上部分,又名唇香草,在我国主要分布在新疆、内蒙古等地区。新塔花全草中的化学成分主要为挥发油、非挥发油两部分,新塔花挥发油为透明淡黄色油状液体,约占全草的2%,国外有学者采用气质联用法和气相色谱法进行化学分析,发现了其中27 种成分,主要包括胡薄荷酮(44.5%)、萜品醇(14.5%)等,非挥发油主要以总黄酮类为主[1-2]。近些年,新塔花在国内外受到广泛关注,大量研究表明,新塔花成分具有抗炎止痛、舒张血管、降血压、抗氧化、改善心肌缺血等作用[3-9],主要用于治疗失眠、高血压、冠心病等疾病,但其作用机制尚不明确[5,10]。目前关于新塔花抗动脉粥样硬化(AS)的研究国内外文献报道较少,本研究运用苏木精-伊红(HE)染色法、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法(Western Blot)探讨了新塔花防治AS 的炎症机制。

1 材料与方法

实验动物:选取40 只8 周龄雄性载脂蛋白E 基因敲除(ApoE-/-)小鼠,10 只同品系C57 普通小鼠,平均体重(18.0±2.0)g,均购于北京维通利华公司;饲养于新疆医科大学医学动物中心。

试药与仪器:新塔花全草购自亳州市中正中药材饮片有限公司,并由专人鉴定;HE 染色试剂盒、阿托伐他汀购自北京Solarbio 公司;逆转录试剂盒、蛋白Marker 购自美国Thermo 公司;Trizol 试剂购自美国Invitrogen 公司;荧光定量PCR 试剂盒购自德国Qingen 公司。

新塔花水提物的制备:取干燥新塔花24.0 g,粉碎后置于圆底烧瓶中,加入200 ml 蒸馏水,加热回流2 h,水提率为75%。洗涤滤渣,将所得有效水提物继续真空悬蒸加热1 h,得新塔花水提物80 ml,定容至100 ml 即为所需新塔花高剂量(含生药0.18 g/ml),稀释1 倍为低剂量(含生药0.09 g/ml)。……

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