赵 美，曾 亚，周晓英

(1.新疆维吾尔自治区伊犁州中医医院，新疆 伊宁 835000；2.新疆医科大学中医学院，新疆 乌鲁木齐 830011；3.新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830011)

1 实验

1.1 材料、试剂与仪器

阿尔泰金莲花，采自新疆博乐温泉，粉碎过筛，备用。

DPPH自由基、Tris、盐酸、邻苯三酚、硫酸亚铁、水杨酸、过氧化氢、抗坏血酸等均为分析纯；荭草苷对照品、牡荆素对照品，宝鸡辰光生物科技有限公司。

752型紫外可见分光光度计，上海菁华科技仪器有限公司；ME204E型电子天平，上海梅特勒-托利多仪器有限公司；KQ-5200DE型数控超声波清洗器，昆山超声仪器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 阿尔泰金莲花总黄酮粗提物的制备

称取阿尔泰金莲花粉末50 g，加入12倍量60%乙醇，回流提取2次，每次 1.5 h，过滤；合并滤液，减压浓缩(60 ℃)至无醇味；浓缩液真空干燥(60 ℃)，得阿尔泰金莲花总黄酮粗提物。

1.2.2 阿尔泰金莲花总黄酮纯化物的制备

称取阿尔泰金莲花粉末 50 g，加入12倍量60%乙醇，回流提取2次，每次1.5 h，过滤；合并滤液，减压浓缩(60 ℃)至无醇味；浓缩液经大孔树脂吸附，水洗除杂后用 30%乙醇洗脱；洗脱液减压浓缩，真空干燥(60 ℃)，得阿尔泰金莲花总黄酮纯化物。

1.2.3 阿尔泰金莲花总黄酮对 DPPH自由基的清除实验

在文献[7-9]的基础上进行改进。分别称取阿尔泰金莲花总黄酮粗提物、纯化物5 mg，用蒸馏水溶解，定容于25 mL容量瓶中，吸取适当体积，稀释，配制成0.20 mg·mL-1、0.15 mg·mL-1、0.10 mg·mL-1、0.05 mg·mL-1、0.02 mg·mL-1、0.01 mg·mL-1、0.005 mg·mL-1的样品溶液。样品组：在试管中加入2 mL样品溶液及 2 mL 1.0×10-4DPPH自由基溶液，摇匀，室温下暗处静置 30 min，测定517 nm处吸光度(A1)；空白组：用同体积的蒸馏水替代样品溶液，测定517 nm处吸光度(A2)；……