陈敏，谢发，游玲,2，王涛,2*

1(宜宾学院 生命科学与食品工程学院，四川 宜宾， 644000)2(固态发酵资源利用四川省重点实验室，宜宾学院，四川 宜宾， 644000)

冠突散囊菌(Eurotiumcristatum)是主要存在于茯砖茶中的一种益生真菌，可产生金黄色闭囊壳，即“金花”[1]，该菌是影响茯砖茶品质的重要因素，不仅可以降低茶的涩味，其菌花香及产生的色素都可增强茶的品质[2]。该菌的代谢产物具有降脂、抗肿瘤细胞活性、促消化等多种功效，菌丝体营养丰富且对人体无毒害[3-7]，常见应用于黑茶[8]的发酵，目前也见中草药[9-10]、食品[11-12]发酵。

小叶苦丁茶是由木犀科女贞属粗壮女贞(Ligustrumrobustum)的鲜叶经杀青、脱水解块、揉捻、粗烘、二次揉捻、干燥、精制而成，具有多种保健功能[13]，本研究借鉴茯砖茶“散茶发花”[14]技术，通过接种冠突散囊菌发酵苦丁茶，赋予其“菌花香”，减少其苦味和粗青气，为苦丁茶新产品开发提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料

小叶苦丁茶，由四川省筠连县冬青御品科技有限公司提供。冠突散囊菌(CICC 2422)，购于中国工业微生物保藏中心。CZG培养基(g/L)：蔗糖40，NaCl 50，K2HPO41，NH3NO33，MgSO4·7H2O 0.5。

1.2 实验方法

1.2.1 液体菌种条件优化

以CZG液体培养基为基准培养基，装液量300 mL/L，28 ℃，120 r/min，培养5 d为基准条件，菌丝干重、菌丝球大小及有性孢子量为评估指标，对蔗糖质量分数(6%、4%、2%)、NaCl质量分数(6%、4%、2%)、pH(4.5、5.5、6.5)采用IBM SPSS Statistics19软件设计正交实验。菌丝干重计量方法、菌丝球大小测量方法分别参照文献[15-16]，有性孢子评估方法为以肉眼评判菌液黄色深浅。

在优化后的CZG培养基(蔗糖60 g/L、NaCl 40 g/L、pH 6.5)中，以28 ℃、培养5 d为基础条件，评估指标同上，围绕转速(140、120、100 r/min)、接种量(12%、10%、8%)、装液量(300、250、200 mL/L)采用上述软件设计正交实验，优化培养条件。……