α-L-岩藻糖甘酶1基因在小鼠不同组织中的表达分析
2020-04-13施晓波陈建林
湖南师范大学自然科学学报 2020年2期
关键词:小鼠
王 道,陈 璇,施晓波,陈建林
(中南大学湘雅二医院妇产科,湖南 长沙 410011)
α-L-岩藻糖苷酶1(α-L-fucosidase1, FUCA1),是细胞表面上多聚溶酶体酸性水解糖的重要组分,可去除糖蛋白末端L-岩藻糖残基,而且在酸性pH值下表现出最佳活性。岩藻糖苷酶的缺陷会引起岩藻糖病,岩藻糖病是一种溶酶体贮积症,症状表现为精神运动性异常、血管角化瘤和生长迟缓[1]。到目前为止,学者们已经鉴定出Fuca1基因中29个不同的突变体存在于染色体1p34上,同时在机体内免疫、信号传导、细胞凋亡、精子成熟、配子间相互作用等方面发挥重要作用[2-4]。近年,研究人员发现结直肠癌[5]和乳腺癌[6]中的α-L-岩藻糖苷酶活性降低,而子宫内膜癌、卵巢癌以及甲状腺癌[7]和胃癌[8]中活性增加。多项研究[9,10]表明岩藻糖基化与肿瘤发生之间存在密切联系,但对Fuca1在肿瘤发生中的功能了解还不够。王道等[11]研究发现Fuca1和Fuca2基因在斑马鱼中的各组织广泛地表达,而且精巢和卵巢中存在高表达,提示Fuca1和Fuca2在鱼类胚胎发育和成体的精巢、卵巢与肝脏发育中可能具有重要的作用。本研究选用小鼠(C57BL/6),探讨Fuca1基因在不同组织器官中的分化表达情况,为进一步了解Fuca1在高等动物中性腺发育的分子机制奠定基础。
1 材料和方法
1.1 实验材料
成熟雌雄小鼠(C57BL/6)被人工饲养在湘雅二医院实验动物房,经麻醉后迅速分离本研究所需的组织器官(脾脏、心脏、大脑、肌肉、肾脏、睾丸、肝脏和卵巢),然后用液氮速冻,置于-80 ℃冰箱贮存。
1.2 主要试剂和仪器
Trizol Reagent购自美国英伟创津公司;……
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