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白灵菇多糖对力竭运动大鼠抗疲劳及抗氧化作用探析*

2020-03-24续延军

中国食用菌 2020年2期
关键词:耗氧量力竭自由基

续延军

(鹤壁职业技术学院体育运动学院,河南 鹤壁 458030)

白灵菇(Pleurotus nebrodensis) 又称为阿魏蘑、阿魏侧耳、阿魏菇,具有较高的营养价值和药用价值。通过相关临床研究显示[1],白灵菇中浸提的白灵菇多糖,具有一定的活性成分,能起到降血糖、降血压、调节血脂的功效。依据运动学专家的相关观点,力竭训练将会导致运动员机体释放出大量自由基,对机体产生较大的不良影响,若自由基未能及时清理,则将在较大程度上影响运动能力[2]。为证明白灵菇多糖对力竭运动后的抗疲劳和清除自由基作用,研究将选取Wistar雄性大鼠作为试验对象进行论证探讨。

1 资料与方法

1.1 材料与设备

选取250只Wistar雄性大鼠,质量为150g~170 g,平均质量为(160.1±10.3) g,在试验过程中使其自由饮水摄食。选购兰考金菇园食品有限公司的白灵菇,选择超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、巯基-SH、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、钙镁离子三磷酸腺苷酶(Ca2+/Mg2+-ATPase)、钠钾离子三磷酸腺苷酶(Na+/K+-ATPase)等物质的试剂盒。

使用RE型蒸发器、UV7502PCS型分光光度计、TD型离心机、GM-33A型真空抽滤泵与HH-4型恒温水浴锅等试验设备。

1.2 试验方法

1.2.1 白灵菇多糖制备

称取一定量的白灵菇子实体清洗后,在40℃恒温箱烘干,粉碎至160目,使用95%乙醇使其脱脂,后添加20 mL纯净水,100℃温度下浸提2 h,过滤、浓缩得到浸提液;后添加20 mL的乙醇,置于4℃沉淀多糖,进行约2 000 r·min-1离心30 min,使用Sevage法去除多余蛋白质,并予以浓缩、冻干,放置于-20℃冰箱中待用。

1.2.2 试验分组

将所选大鼠分为对照组(I)、力竭组(II)、力竭休息组(III)、白灵菇多糖力竭组(IV)、白灵菇多糖力竭休息组(V)共5组,白灵菇多糖组大鼠每日灌胃80 mg的多糖水溶液30 d,I组、II组、III组分别连续灌胃30 d生理盐水,末次灌胃30 min后进行试验检测。参照Bedford模型,使其进行30 d跑台运动,前 1 d~5 d,运动速率为 16.0 m·min-1,坡度为0,运动时间为25 min;6 d~10 d,速率为16.2 m·min-1,坡度为 5°,运动时间为 25 min,耗氧量为(57.5±1.4) mL·kg-1min-1;11 d~15 d,速率为16.2 m·min-1,坡度为 5°,运动时间为 35 min,耗氧量为(57.5±1.4) mL·kg-1min-1;16 d~20 d,速率为27.8 m·min-1,坡度为 5°,运动时间为 35 min,耗氧量为(73.4±2.6) mL·kg-1min-1;21 d~25 d,速率为27.8 m·min-1,坡度为 5°,运动时间为 35 min,耗氧量为(73.4±2.6) mL·kg-1min-1;26 d~30 d,速率为27.8 m·min-1,坡度为 10°,运动时间为 25 min,耗氧量为(80.1±3.2) mL·kg-1min-1。最后 1 次运动结束后,在安静状态下处死I组大鼠;IV组与V组大鼠每日运动后灌胃白灵菇多糖;最后一次力竭运动后,处死II组与IV组大鼠,使III组与V组大鼠均休息12 h后再进行处死。

1.2.3 试验材料处理

各组大鼠处死前8 h禁饮,处死后立即提取适量的肝组织破碎得到肝匀浆,后于4℃,2 000 r·min-1条件下离心20 min,除去沉淀部分,3 000 r·min-1离心20 min,获得沉淀即为肝组织样品,使用超声波仪器对其予以破碎处理,待用。

1.3 数据统计

1.3.1 白灵菇多糖对大鼠抗氧化能力的影响

判断是否力竭应观察大鼠运动时,速度降低,臀部在笼体后壁,后肢体随皮带自然转动达 30 s,利用电刺激方法没有效果,可判断为力竭[3]。使用前期处理大鼠肝组织参照说明书进行GSH-Px、NOS、-SH、MDA、NO、SOD等活性物质的测定。

1.3.2 白灵菇多糖对大鼠NO-NOS、ATPase活性的影响

大鼠所获肝组织材料按南京建成生物有限公司提供试剂盒的说明进行NO-NOS,ATPase等物质检测,以每毫克蛋白每小时新产生的无机磷的微摩尔数为一个酶的活性单位,即1 μmol·mg-1h-1。

1.4 统计学处理

采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析,符合正态分布的数据用均数±标准差(±s) 表示,两组间比较采用t检验,不符合正态分布者转换为正态分布后行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 白灵菇多糖对大鼠抗氧化能力的影响

白灵菇多糖对大鼠抗氧化能力情况见表1。

由表1所示,运动力竭试验数据统计后,II组、III组的GSH-Px活力、SOD活力与-SH含量明显低于I组,MDA水平明显高于I组,V组抗氧化指标要比II组、III组有显著提高,与I组相当;与II组相比,IV组的各项指标显著恢复,但差于I组。

2.2 白灵菇多糖对大鼠NO-NOS、ATPase活性的影响

白灵菇多糖对大鼠NO-NOS、ATPase活性的影响见表2。

由表2所示,服用白灵菇多糖后,NOS活力及NO含量、线粒体Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力明显低于I组,但高于II组;休息12 h后NOS活力、NO含量和线粒体指标与I组一致,但人高于II组、III组与 IV 组,差异显著(P<0.05)。

表1 白灵菇多糖对大鼠抗氧化能力的影响Tab.1 Effect of Pleurotus nebrodensis polysaccharide on antioxidant capacity of rats

表2 白灵菇多糖对大鼠NO-NOS、ATPase活性的影响Tab.2 Effects of Pleurotus nebrodensis polysaccharide on NO-NOS and ATPase activities in rats

3 讨论

依据相关的临床研究显示[3],白灵菇多糖具有较强的还原力,且能够对DPPH·、超氧阴离子与羟基自由基具有良好的清除效果,除此之外,还能抑制脂质过氧化,原因在于白灵菇多糖分子上的醇羟基能够与自由基产生作用,从而具有较强的还原力,醇羟基能够传递质子与电子,能与DPPH·进行结合,其活性基团能与金属离子反应,可清除超氧阴离子与羟基自由基[4]。当对大鼠使用白灵菇多糖后,GSH-Px活力、SOD活力与-SH含量明显提升,MDA含量明显降低,表明白灵菇多糖具有良好的增强机体抗氧化的能力;肝组织线粒体Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力明显提升,休息12 h后,NOS活力、NO含量恢复正常,说明白灵菇多糖具有良好的提升机体恢复的能力,原因在于白灵菇多糖能够在较大程度上清除DPPH·、超氧阴离子与羟基自由基,因而能够获得上述良好的效果。

通过研究,认为白灵菇多糖能够增强机体抗氧化能力,并且能够增强机体的恢复能力,可作为力竭运动后快速恢复的首选物质,但其实际运用仍然需要进行进一步的研究。

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