张 志,张丽丽,2,吴发兴,刘 爽,董雅琴,张 慧,张 峰,崔 进,李晓成∗ (.中国动物卫生与流行病学中心,山东 青岛266032;2.青岛农业大学 动物医学院,山东 青岛26609)

塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA)为单股正链不分节段的RNA 病毒,是小RNA 病毒科(Picornaviridae)的塞尼卡病毒属的唯一成员[1]。与其他小RNA 病毒科的病毒类似,其直径约为27 nm,基因组大小约为7.3 kb,SVA 的基因组由5′端、3′端和1个大的开放阅读框架(ORF)组成,ORF编码形成1个由2 181氨基酸组成的多聚蛋白前体,多聚蛋白前体可进一步水解形成VP4～1等4个结构蛋白和2A～2C、3A～3D 等7个非结构蛋白[2]。2012年有学者发现SVA 可引起猪的水泡样病变,感染猪的鼻吻部、蹄部冠状带等出现明显水泡[3],自此以后,人们对SVA 逐渐重视,美国、加拿大、巴西、中国、泰国、哥伦比亚等养猪业比较发达的国家陆续也从出现水泡病的猪病料中检测到SVA[4-8]。但是SVA 感染引起的病变在临床上与口蹄疫(FMD)、猪水泡性口炎、猪水疱病、猪水泡性疹等疾病的病变十分相似[9],仅依靠临床病变很难做出确诊,迫切需要新的实验室诊断方法。荧光RT-PCR 方法因其特异性强、敏感性高、重复性好的特点在兽医领域广为应用,本研究在前期分离到1株SVA 的基础上,设计不同的探针和引物,并经过临床应用,建立了一种检测SVA 的TaqMan探针荧光RT-PCR 方法。

1 材料与方法

1.1 样品和病毒来源48份猪SVA 临床样品,采自我国部分屠宰场。SVA 病毒株GXT91,由本实验室分离鉴定和保存。口蹄疫O 型RNA 提取自FMDV O 型灭活苗,猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒等均由本实验室保存。……