向双云 周珍辉 杨生涛 陈倩茹 白丫丫 刘 莹

（北京农业职业学院畜牧兽医系 北京 102442）

大肠杆菌是肠道内的共生菌，也是导致畜牧业细菌性疾病最常见的病原菌。随着抗生素的随意滥用，大肠杆菌产生的耐药性越来越复杂，且可通过菌毛传播耐药质粒，这给大肠杆菌病的免疫预防带来了极大挑战。研究大肠杆菌的耐药性，不仅能为兽医临床用药和兽药管理提供科学依据，也可以为新药的研究奠定定理论基础。为此，课题组从病原性大肠杆菌的分离培养入手，采用纸片扩散法和牛津杯法药敏试验测定了大肠杆菌对抗生素和中草药的耐药性，以其找到杀灭大肠杆菌最敏感的抗生素及找寻能替代抗生素的中草药。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验菌种 大肠杆菌，由北京农业职业学院微生物实验室提供。

1.1.2 试验药品 氨苄西林、林可霉素、庆大霉素、青霉素、链霉素、红霉素、恩诺沙星、头孢拉定，由芮城绿曼生物制药有限公司提供。金银花、黄芩、合欢皮、青皮、陈皮、小茴香、薄荷、鱼腥草、板蓝根，由北京农业职业学院药理实验室提供。

1.1.3 主要试剂 营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、麦康凯培养基、伊红美蓝培养基，由北京农业职业学院微生物实验室提供。

1.1.4 主要仪器 生化培养箱、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、电子天平，由北京农业职业学院微生物实验室提供。

1.2 方法

1.2.1 大肠杆菌的分离培养 从发病鸡体内无菌操作采集部分十二指肠、空肠、盲肠，用接种环无菌采取肠内容物，直接接种至肉汤培养基中，放入培养箱中培养18～24h。……