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覆盆子及其制剂的质量控制研究进展*

2020-03-08李熠雯周燕霞

广州化工 2020年19期
关键词:椴树覆盆子测定方法

李熠雯,周燕霞

(1 上饶市人民医院,江西 上饶 334000;2 江西医学高等专科学校,江西 上饶 334000)

覆盆子,又称掌叶覆盆子,为蔷薇科(Rosaceae)悬钩子属(Rubus)植物,主要指华东覆盆子(RubuschingiiHu)未成熟的果实,是临床疾病治疗中常用的一种中药材之一。研究表明,中药材覆盆子及其制剂通常用来治疗遗尿尿频、阳痿早泄、遗精滑精、目暗昏花等疾病[1]。近年来,随着覆盆子药材及其制剂的广泛使用,不少学者逐渐加深对覆盆子及其制剂的质量控制研究,包括建立了以椴树苷、鞣花酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷等为指标成分的含量测定方法,各研究者也多采用HPLC对覆盆子制剂进行质量控制研究。本文对近年来覆盆子及其制剂的质量分析研究成果进行综述,为为覆盆子药材的资源开发利用、为覆盆子及其制剂质量控制方法的进一步建立和完善提供依据。

1 覆盆子药材质量控制方法

1.1 性状鉴别

2015版《中国药典》中对覆盆子进行了性状鉴别,规定:覆盆子粉末为棕黄色。非腺毛单细胞,长60~450 μm,直径12~20 μm,壁甚厚,木化,大多数具双螺纹,有的体部易脱落,足部残留而埋于表皮层,表面观圆多角形或长圆形,直径约至23 μm,胞腔分枝,似石细胞状。草酸钙簇晶较多见,直径18~50 μm。果皮纤维黄色,上下层纵横或斜向交错排列[2]。

1.2 薄层色谱法

薄层色谱法(TLC)是对药材定性鉴别的常用方法之一,其简便、快速,专属和重现性好。2015版《中国药典》中对覆盆子增加了覆盆子TLC定性鉴别。以椴树苷为对照品,以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(90:4:4:0.5)为展开剂,喷以三氯化铝试液,在紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点[2]。

1.3 分光光度法

分光光度法已广泛应用中药质量控制中,其不仅可用于物质的鉴定及结构分析,而且还可用于某些含量的测定[3]。郭宣宣等[4]以齐墩果酸为对照品,香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色体系,采用可见分光光度法在480 nm处测定了15批不同产地野生及栽培覆盆子中总三萜的含量。

1.4 比色法

比色法作为一种定量分析的方法,也常用于中药有效成分含量比较和测定。余丽焓等[5]以没食子酸为对照品,采用Folin-Ciocaileu比色法对不同产地覆盆子中的总酚含量进行比较。孙萍等[6]以芦丁为对照品,采用比色法对覆盆子果总黄酮进行了微波提取及含量测定研究。

1.5 色谱法

色谱法具有快速、灵敏的有点,是中药质量控制中最常见方法。主要包括HPLC法、LC-MS法、MIPs-HPLC法等。2015版《中国药典》[2]中对覆盆子以鞣花酸和山柰酚-3-O-芸香糖苷为指标成分,进行HPLC含量测定。其中,鞣花酸以乙腈-0.2%磷酸溶液(15:85)为流动相,检测波长为254 nm,含量按干燥品计算,含鞣花酸不得少于0.02%;山柰酚-3-O-芸香糖苷以乙腈-0.2%磷酸溶液(15:85)为流动相,检测波长为344 nm,含量按干燥品计算,含山柰酚-3-O-芸香糖苷不得少于0.03%。Zeng等[7]建立了不同产地覆盆子的HPLC指纹图谱及总黄酮的含量测定方法;有学者以鞣花酸和5种黄酮成分(芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、椴树苷)为指标成分,建立了以乙腈(A) -0.2%磷酸溶液(B)为流动相,360 nm为检测波长的HPLC含量测定方法,对17批不同产地的覆盆子进行了含量测定[8]。马亚娟等[9]以紫云英苷、椴树苷、槲皮素、山柰酚为指标性成分,以乙腈-0.1%甲酸为流动相,266 nm为检测波长,建立了覆盆子中4种黄酮的MIPs-HPLC含量测定方法。曹富等[10]以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相,205 nm为检测波长,建立了覆盆子中山楂酸、科罗索酸和齐墩果酸3种三萜酸的HPLC含量测定方法。陈晓红等[11]以甲醇-0.5%磷酸水溶液为流动相,以360 nm为检测波长,通过聚类分析和主成分分析对15批浙产覆盆子进行了HPLC指纹图谱研究。毛菊华等[12]采用HPLC法,用三个色谱系统分别对华东覆盆子不同药用部位果实(覆盆子)和根及残茎(搁公扭根)中黄酮类、三萜类和鞣质类成分进行测定。平欲晖等[13]以甲醇-0.1%磷酸水为流动相,以366 nm为检测波长,建立了覆盆子中椴树苷和山奈酚的HPLC含量测定方法。钟瑞建等[14]以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,在344 nm检测波长下建立了覆盆子中山柰酚-3-O-芸香糖苷和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷HPLC。Zhang等[15]建立了未熟覆盆子中多糖、黄酮、皂苷和生物碱4种成分的含量测定方法并进行了含量测定。Zan等[16]通过大鼠灌胃覆盆子提取物实验,建立了同时测定大鼠血浆中isoquercitrin, kaempferol-3-O-rutinoside和tiliroside 3种成分的LC-MS/MS方法。Chai等[17]通过多波长切换法建立了覆盆子中adenosine, gallic acid, brevifolin carboxylic acid, ethyl gallate, ellagic acid, kaempferol-3-O-rutinoside, kaempferol-3O-β-D-glucopyranoside和tiliroside 8个成分的UPLC同时测定方法。何建明等[18]以乙腈-水为流动相,以265 nm为检测波长,建立了覆盆子药材中鞣花酸、异槲皮苷、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷、椴树苷和山柰酚的HPLC-UV和覆盆子苷-F5的HPLC-ELSD含量测定方法。

此外,还有学者建立了覆盆子中5种有机酸(草酸、酒石酸、抗坏血酸、苹果酸、枸椽酸)的HPLC含量测定方法;覆盆子黄酮类化合物含量的三波长紫外分光光度法;浙产覆盆子药材的HPLC指纹图谱以及覆盆子中铁、镁、钠、锌4种金属元素的原子吸收光谱法含量测定方法[19-20]。

2 成方制剂的质量分析

关于覆盆子成方制剂质量分析的报道不多。郭丰[21]以鞣花酸为指标成分建立了人参地黄桑椹片中覆盆子鉴别的HPLC含量测定方法,并暂定了人参地黄桑椹片中含覆盆子以鞣花酸计算,含量不得少于 0.15 mg/片。钟宇富等[22]建立以椴树苷和鞣花酸为指标成分分别建立了好要汤(由覆盆子、黄精、玉竹、酸枣仁等中药组成)中覆盆子的TCL鉴别和HPLC含量测定方法,结果不同批次好要汤中鞣花酸含量为0. 698±0.013 mg·g-1;陈亚龙等[23]以椴树苷为对照品建立了益视口服液(由党参、当归、覆盆子、山药、制何首乌等十四味中药组成)中的覆盆子TCL鉴别方法,要求在对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点。董秋菊等[24]建立五子衍宗方(由枸杞子、炒菟丝子、覆盆子、盐车前子和蒸五味子组成)制剂的HPLC指纹图谱,要求供试品特征图谱中应呈现5个特征峰,其中4个峰应分别与相应的对照品参照物溶液的保留时间一致,峰1应与对照药材参照物溶液主峰的保留时间一致。周建良等[25]采用组合对照药材随行对照,基于组合对照药材的高效液相色谱特征图谱对五子衍宗方制剂中覆盆子药材进行了表征。

3 结 语

覆盆子作为药食两用的传统中药,在我国已有几千年的使用历史,常单用或者作为中药成方制剂的组成药。我国覆盆子资源分布较广,为满足需求,已逐步从野生状态开始向培育种植转变,但仍然存在品种选育工作力度不够,人工栽培面积偏少,质量参差不齐等问题。因此,有必要进一步加大覆盆子及其制剂质量控制的研究力度,以进一步完善覆盆子的质量控制方法,保障覆盆子及其制剂的质量和疗效。

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