李睿文，安 琪，宋梦昭，赵兴华，张 铁，陈福星，王建昌，张若曦，李丽敏,4，郭笑然，孙继国,4，胡 满,4，袁万哲,4

(1.河北农业大学动物医学院，河北 保定 071001;2.河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心，河北 石家庄 050051;3.河北省动物疫病预防控制中心，河北 石家庄 050035;4.河北省兽医生物技术工程技术研究中心,河北 保定 071001)

布鲁氏菌病(简称“布病”)是由布鲁氏菌属细菌引起的以感染家畜为主的人兽共患传染病[1]。世界动物卫生组织(OIE)将其列为B类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。近年来，国内外多个地区有人畜感染发病的报告[2-3]。为贯彻落实《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》，进一步做好全国布病的防治工作，有效控制和净化布病，农业部、国家卫生计生委2016年9月7日发布了“国家布鲁氏菌病防治计划(2016—2020年)”，计划要求河北、山西、内蒙古、辽宁、吉林、黑龙江、陕西、甘肃、青海、宁夏、新疆共11个省份和新疆生产建设兵团2020年达到并维持控制标准。为了解河北省羊布病免疫和流行情况，有效开展羊布病防治，2018年4—5月，本项目组对河北省5个地区10个养羊场进行现场调查，并采集血液分离血清进行检测，报告如下。

1 材料与方法

1.1 血清 从河北省保定、衡水、邢台、秦皇岛、承德5个地区10个养羊场采集羊颈静脉血液316份，分离血清后置-20 ℃保存备用。

1.2 试剂 布鲁氏菌竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)抗体检测试剂盒，购自中国农业科学院兰州兽医研究所，证书号：(2016)新兽药证字6号。

2 结果

2.1 不同羊场布病血清学检测 用cELISA方法检测的数据见表1。10个羊场均未接种布病疫苗。未接种疫苗羊场布病个体阳性率17.4%，场群阳性率80%。表明河北省羊群中仍有布病的感染和流行。

表1 不同羊场布病血清学检测

2.2 不同性别羊只布病血清学检测 根据表2可知，10个非免疫羊场不同性别羊只布鲁氏菌的感染率不同，其中公羊的阳性率为13.3%，母羊的阳性率为20.4%，公羊的感染率低于母羊。

表2 不同性别羊只布病血清学检测

2.3 不同生长阶段羊布病血清学检测 根据表3可知，10个非免疫羊场不同生长阶段羊布病感染率不同，其中羔羊的阳性率为10.5%，育成羊的阳性率为14.4%，种羊的阳性率为25.2%。种羊比羔羊、育成羊的阳性率高，而育成羊的阳性率高于羔羊。

表3 不同生长阶段羊布病血清学检测

3 讨论

布病是由布鲁氏菌所引起的一种人兽共患传染病。牛、羊、猪最为常发，且可传染给人和其他家畜[4]，严重危害畜牧业生产与人体健康。近年来，我国多个地方有人畜感染发病的报告。通过本调查发现，河北省羊群中仍有布病的感染和流行，其中母羊的感染率略高于公羊，种羊感染率高于羔羊、育成羊。造成布鲁氏菌感染和流行的原因有：(1)羊场生物安全防控意识淡薄。生物安全涵盖建筑性生物安全措施，即物理性屏障，包括羊场选址、布局、设施等。也涵盖观念性生物安全措施，即制度与计划，包括限制人员、全进全出、病死羊处理、消毒程序等。调查发现，羊场从业人员普遍缺乏生物安全意识，简单地认为疫病防控主要靠疫苗与药物，缺乏生物安全防控意识。主管部门应加强宣传教育与技术培训，引导羊场逐渐树立生物安全防控意识；(2)活羊跨区调运仍然是疫病发生的导火索。目前河北省唐县、卢龙等地已形成专业羊只育肥，育肥羊大多数来自省外，免疫与感染背景不清楚，加之长途运输，到场后发病情况较多。应鼓励养羊企业自繁自养，尽量减少活羊跨区调运，对于外调羊只，应该加强检疫，严查非法调运。同时兽医、屠宰工人、皮毛加工工人、挤奶工等要做好自身的防护工作，防止高危人群的感染；羊场应加强布病检疫，及时淘汰阳性羊只；种羊场自繁自养建立布病阴性羊群；高风险地区，商品羊可采用布病疫苗进行免疫。

目前羊场可使用的疫苗有布鲁氏菌病活疫苗(S2株)，该疫苗适于口服免疫，山羊和绵羊无论年龄大小，一律口服活菌100亿；亦可作皮下或肌内注射，但注射法不能用于孕畜、牛和小尾寒羊，另外注射剂量有差异，其中山羊注射25亿、绵羊50亿，免疫保护期均为36个月。另有研究表明，布病疫苗皮下或肌内注射产生的免疫效果优于灌服、面团口服和饮水。“国家布鲁氏菌病防治计划(2016—2020年)”规定：在全国范围内，种畜禁止免疫，实施监测净化；奶畜原则上不免疫，实施检测和扑杀为主的措施，另外个体病原阳性率超过2%的县，由县级兽医主管部门提出申请，报省级兽医主管部门批准后实施免疫。一类地区采取以免疫接种为主的防控策略；二类地区采取以监测净化为主的防控策略；三类地区采取以风险防范为主的防控策略。河北省为一类地区，按照要求，免疫地区的家畜应免尽免，畜间布病免疫场群全部建立免疫档案。到2020年，河北省布病达到并维持控制标准。但应注意，河北省内拟申报布病净化创建场或示范场的养羊场不建议进行布病免疫。免疫接种时间在配种前1～2个 月进行较好(3年免疫1次即可)，3月龄以下羔羊、妊娠母羊和种公羊、有该病的阳性羊(可在免疫前进行布病检疫)，均不能进行预防接种。

本次血清学调查采用的是竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)，同时本实验室也采用虎红平板凝集试验进行了平行试验(数据未报道)，通过数据可以看出cELISA比虎红平板凝集试验灵敏，可能的原因是虎红平板凝集试验存在假阳性和假阴性，并且是用肉眼直接观察结果，误差较大。虎红平板凝集试验出现假阳性，可能是因为严重溶血、抗原抗体反应时间过长后出现纤维素的凝集块；出现假阴性反应可能是因为抗体亲和力低或者滴度低。但虎红平板凝集试验快速、便捷，适用于基层快速检测，可以做初步筛查，同时可与其他检测方法结合进行结果判定。