郭兆诚

【摘 要】目的：研究溶血、脂肪血对血站血筛HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA核酸检测（NAT）结果的影响。方法：应用苏州华益美核酸检测系统及配套专用试剂，分别于5倍本核酸检测系统检测下限（LOD）浓度的HBVDNA21.0IU/ml、HCVRNA62.5IU/ml、HIVRNA211.5IU/ml样本，采用坼分单检模式进行NAT;对含终浓度为5倍LOD的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA样本的4组溶血样本的检测结果。结果：溶血样本[血红蛋白Hb浓度分別为0mg/dl（对照）、0mg/dl、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl]，脂肪血样本[甘油三酯TG浓度分别为0.76mmol/L（对照）、17mmol/L、28mmol/L、34mmol/L]的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA检测循环阈值（Ct值）差异均无统计学意义（P>0.05）;Hb≤1000mg/dl以及TG≤34mmol/L时，对血站血筛NATHBVDNA、HCVRNA、HIVRNA没有显著性影响。

【关键词】溶血;脂血;核酸检测

【中图分类号】R450【文献标识码】A【文章编号】1005-0019（2020）04--01

核酸检测技术能缩短病毒感染标志物检测的“窗口期”以及检出因病毒变异、隐匿性感染等而漏检的污染血液，降低了经输血传播疾病的风险[1]，但在实际核酸检测工作中，标本的溶血、脂肪血等样本质量因素可能会直接影响核酸检测结果的准确性[2-3]。鉴于此本文旨在探讨分析溶血、脂血标本对于血液核酸检测的影响。

1 材料和方法

制备溶血血浆样本4份，2ml/份 （血红蛋白Hb浓度分别为0mg/dl（对照）、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl）;脂血样本4份，2ml/份（甘油三酯TG浓度分别为0.76mmol/L（对照）、17mmol/L、25mmol/L、34mmol/L），然后加入 HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA标准品，使得检测的终浓度分别为检测下限的5倍。HBVDNA、HCV RNA、HIV RNA 分别准备16份（每种Hb浓度单阳3份，混三阳1份，共4种浓度）+16份（每种TG浓度单阳3份，混三阳1份，共4种浓度）样本。

2 仪器和试剂：

苏州华益美核酸检测系统，PCR-荧光法;ABI PCR7500;苏州华益美乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒人类免疫缺陷病毒（1+2型）核酸检测试剂盒（有效期内使用）;

3 核酸检测：

每份样本上机双孔平行坼分单检模式检测。

4 统计学分析：

采用SPSS17.0软件进行t检验，计量资料以均数±标准差标识，P<0.05认为差异有统计学意义。

5 结果

5.1 溶血标本与对照组溶血组与对照组重负检测的Ct值比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1-表3。

5.2 脂血组与对照组重负检测的Ct值比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

6 讨论

本研究结果显示，使用苏州华益美核酸血筛系统检测 HBV DNA，HCV RNA，HIV RNA，溶血组与对照组、脂血组与对照组比较的差异无统计意义，提示血液标本中血红蛋白Hb浓度≤正常参考值范围上限的250倍，甘油三酯TG的浓度≤正常参考值范围上限的20 倍时，不会因为溶血、脂血因素导致核酸结果出现假阳性或者假阴性。尽管华益美核酸血筛系统试剂使用说明书注明溶血样本血红蛋白Hb浓度≤500mg/dl，脂肪血样本甘油三酯TG浓度≤28mmol/L对检测结果无影响，但是实际检测工作中，当脂血浆表面时，我们都会将乳糜层去除后再进行检测，尽量减少脂肪颗粒对检测造成影响。

虽本研究提升溶血、脂血标本对于苏州华益美核酸血筛系统的检测结果无明显影响，但还示需要按照相关标准规范采集记一系列相关处理。

参考文献

张妍，朱海峰，孙波，等.核酸检测技术在血液筛查中的应用及分析[J].中国输血杂志，2012（12）：1298-1300.

陈晓华，赵田.影响 FQ-PCR 检测 HCV RNA 结果的标本因素[J].中国误诊学杂志，2010 （4）：345-346.

何成涛，马贵明，赵静.血站核酸检测工作的质量控制[J].临床血液学杂志，2015，1074-1076.