荆玲侠 卜朝阳 崔学强 狄清琳 卢家仕

摘要：为了确定素馨属植物ISSR-PCR反应的最佳体系，以素馨属植物叶片为材料，采用单因素试验和正交试验设计2种方法对影响素馨属ISSR-PCR反应中的dNTPs 、Taq DNA聚合酶、引物、模板 DNA以及Mg2+ 5个因素进行4个水平的优化试验，通过试验建立了素馨属25 μL最佳反应体系：dNTPs浓度为0.10 mmol/L、Taq DNA聚合酶用量2.5 U、引物浓度为0.7 μmol/L、模板 DNA用量为2.5 ng、Mg2+浓度为1.0 mmol/L。在最佳反应体系下，从100条ISSR引物中筛选出了8条ISSR引物，并确定了各引物的最佳退火温度。利用29份素馨属材料进行最佳反应体系的验证，结果表明，该优化体系扩增条带清晰，稳定性高，重复性好，表明该反应体系适用于素馨属植物ISSR分子标记的研究。本研究可为素馨属植物遗传多样性以及亲缘关系等方面的研究提供参考依据。

关键词：素馨属;ISSR-PCR;单因素试验;正交设计

中图分类号： S684.01;S188  文献标志码： A  文章编号：1002-1302（2020）23-0071-08

素馨属（Jasminum）隶属于木樨科（Oleaceae）素馨亚科（Jasminoideae），该属植物枝叶繁茂，花形优美，且多具芳香性，不乏观赏价值较高的植物[1]。目前，素馨属在我国有47种、1个亚种、4个变种，该属植物主要包括多种素馨、毛茉莉和茉莉花[2-3]。

目前，有关素馨属植物分子方面的研究仍然比较欠缺。刘忠等利用TRAP技术对采自广西周边地区的28份茉莉种质资源进行了遗传多样性研究，并利用聚类分析将这28份茉莉材料聚为5个类群[4]。邱长玉等从100个ISSR随机引物中筛选出10个多态性引物对广西横县境内的30份茉莉花材料进行了研究[5]。此外，陈笛等利用RT-PCR和RACE技术对茉莉花萜类香气物质合成途径中的关键酶进行扩增，以研究其在茉莉花开放过程中的表达情况[6-7]。……