张忠子

（东北大学秦皇岛分校，河北 秦皇岛 066004）

红菇 （Russula vinosaLindbled） 属担子菌门 （Basidiomycota）伞菌纲（Agaricomycetes）红菇目（Russulaemetica） 红菇科 （Russulaceae）。红菇子实体质地鲜嫩，色泽艳丽，并且内含较多营养物质。根据相关报道可知，红菇多糖的生物活性非常丰富，具备一定的免疫调节、抗肿瘤、抑菌以及抗氧化的作用[1]。红菇被称为“南方红参”，其作用包括健胃强肾、脾肝补血等。若是儿童出现泄泻症状，常会运用红菇蕾炖汤的方式达到止泻效果；妇女生产完会食用红菇，以达到滋补之效。在烹饪时，若是添加一些红菇，不但能够发挥色彩搭配的效果，还能够增加汤水的甜度，使得汤水的味道更佳。因为红菇不但是天然味精，还是良好的天然色素，所以人们在饮食上往往会添加一些红菇。红菇的生长环境非常特殊，一年只生长一次，生长环境属于典型的高温、高湿环境。此外，红菇生长的地域同样非常特殊，仅仅在茂密椴木树下的沃土区域生长，并且红菇每天都会在相同的区域下生长，因此采菇者每年都能在相同的区域内采集红菇。

现今，中国已经有很多专家针对红菇生态、资源调研、红菇运用以及分离纯化等进行相关研究[2]，并且在药用植物抗疲劳的方向上也已经有较多的研究成果，如金香子等提出龙胆草提取物可以导致小鼠在进行45 min 的游泳运动之后，机体的肝糖原水平显著提升，而乳酸水平则会显著降低，可见龙胆草提取物能够发挥一定的抗疲劳效果。但是，现今并未有相关研究证实红菇的抗运动性疲劳效果。鉴于此，以小鼠为研究对象，分析红菇子实体提取液的抗疲劳效果，主要监测指标包括小鼠的乳酸脱氢酶水平、负重游泳力竭时长、肝糖原水平等，针对红菇子实体提取液的抗运动性疲劳作用进行系统性的分析，以期为野生红菇的运用及推广提供借鉴及参考。

1 试验方法

1.1 基本情况

雄性昆明小鼠，来源于昆明医科大学动物研究中心。年龄4 周龄， 体重19.5 g～20.0 g。红菇子实体干品为容县野生红菇干品。

1.2 主要试剂与仪器

试验用试剂等级均为分析纯，浓硫酸、75%乙醇、蒽酮、三氯甲烷、柠檬酸三钠、冰醋酸、SOD 试剂。试验设备：小鼠游泳缸，自制，规格50 cm×50 cm×40 cm；全自动细胞分析仪、FWl00 型高速万能粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；加样器、YPl02N 型电子天平，上海精密科学有限公司；L420台式低速自动平衡离心机，长沙湘仪离心机仪器有限公司；HH-S2 型双孔数显电热恒温水浴锅，江苏金坛市医疗仪器厂；抗凝管，由玉林市第二人民医院提供；电磁炉、玻璃组织匀浆器、石英秒表、721型可见分光光度计，上海精密科学仪器厂；全自动生化分析仪，玉林第二人民医院。

1.3 红菇子实体提取液的制备(水浴浸提法)

在80℃的环境下进行鲜菇的烘干粉碎操作，并且以料液比l∶20 的比例，在90℃恒温水浴的条件下进行4 h 的水浴处理，之后进行15 min 的离心处理，转速设置为4 000 r·min-1，取上清液，借助水浴蒸干的方式得到相应浓度的红菇子实体提取液，即200 mg·mL-1、100 mg·mL-1。

1.4 负重游泳力竭时间

针对小白鼠进行3 周的不间断灌胃操作，最后1 次灌胃0.5 h 后，在3 组中分别选6 只小鼠，根据小白鼠体重的5%进行重量负荷的设定，并且在水深30 cm，水温25℃～27℃，50 cm×50 cm×40 cm 的水槽中让小白鼠进行游泳，1 个水槽内同时仅可容纳4只小鼠。针对小白鼠的游泳情况进行分析，并且详细记录下来，小白鼠游泳力竭时间系小白鼠由入水到力竭沉入水底，并且10 s 内没有浮出水面这个阶段的时长。

1.5 测定运动后小白鼠血清中乳酸脱氢酶

针对小白鼠进行3 周的不间断灌胃操作，最后1次灌胃0.5 h 后，在3 组中分别选6 只小鼠，在30℃的水槽中进行90 min 的游泳操作。游泳结束之后采取拔眼球取血的方式，获得全血之后将其存储在收集管内，并且进行血清的分离处理，进行相关参数的测定。考虑到试验数据的可靠性，并且为了降低系统性误差，借助全自动生化分析设备进行血清内LDH 水平的检测，并将检测结果详细记录下来，展开t-检验。

1.6 肝糖原含量的测定

最后1 次灌胃0.5 h 之后，在3 组中分别选6 只小鼠，在30℃的水槽中进行90 min 的游泳操作。游泳结束后采取拔眼球取血的方式，之后在较短的时间内取出小白鼠的肝脏，并且利用生理盐水进行处理，借助洁净的滤纸吸干。精密称定1.0 g 肝脏，往其中滴加5%三氯醋酸8 mL，借助玻璃组织匀浆器将其磨碎，并在转速3 000 r·min-1的条件下进行15 min 的离心处理，之后利用上清液进行肝糖原水平的检测，所运用的测定原理是蒽酮法。

1.7 统计学处理

2 结果与分析

2.1 提取液对试验小鼠负重游泳力竭时间影响

红菇提取液对小鼠负重游泳至力竭死亡时间的影响见表1。

表1 红菇提取液对小鼠负重游泳至力竭死亡时间的影响Tab.1 The effect of Russula vinosa extract on the death time of mice from weight-bearing swimming to exhaustion

如表1 所示，不间断地进行3 周不同剂量的红菇子实体提取液灌胃处理之后，2 个试验组的小鼠负重游泳时长都得到明显延长，并且相较于对照组而言，低剂量组的负重游泳时长显著延长，即存在统计学意义，但是高剂量组和对照组小鼠的负重游泳时长差异并不存在统计学差异[3]。

2.2 提取液对试验小鼠乳酸脱氢酶和肝糖原的影响

红菇提取液对小鼠乳酸脱氨酶和肝糖的影响见表2。

表2 提取液对试验小鼠乳酸脱氨酶和肝糖的影响Tab.2 Effect of extract on lactate deaminase and liver sugar in experimental mice

如表2 所示，不间断地进行3 周不同剂量的红菇子实体提取液灌胃处理之后，发现红菇提取液高剂量组、低剂量组都可以使得机体肝糖原水平得到提升，并且相较于对照组而言，高剂量组小鼠的肝糖原水平得到显著提升，即差异存在统计学意义，而低剂量组和对照组小鼠之间的肝糖原水平差异并不具备统计学价值[4-5]。此外，红菇提取液高、低剂量组相较于对照组小鼠的乳酸脱氢酶水平，均有显著降低，差异存在统计学价值（P＜0.05）。

3 结论

疲劳是一种非常复杂的生理机制，通常系指机体的各项生理功能已经不能持续维持在特定范围内，或是不能维持特定的运动水平，进而导致生理或是心理状态出现明显的下降，这就会使得工作效率或是工作能力出现明显的衰退。而疲劳出现的关键性原因是能源物质的大量消耗与代谢物质的不断堆积。

强化运动耐力，能够有效强化抗疲劳能力。游泳时长能够体现动物实际运动的疲劳情况。而本研究能够针对红菇水提液是否可以延长负重小鼠的游泳时长进行直观性的观察及分析，根据最终研究数据显示两个受测试剂量组相较于对照组小白鼠来说，低剂量组（100 mg·mL-1）可以使得负重游泳时长得到显著延长，差异存在统计学价值，可是高剂量组（200 mg·L-1）与对照组小白鼠间并不存在显著差异（P＞0.05）。

糖原的储存量会对小白鼠的运动能力产生严重影响。根据研究数据可知，2 个受测试剂量组相较于对照组而言，其肝糖原水平较高，并且高剂量组小白鼠的肝糖原水平明显较高，差异存在统计学价值。这就表示红菇水提液可以借助增多能量物质的方式，提供能量，发挥抗疲劳效果[6-7]。在剧烈运动的情况下，仅借助有氧氧化的方式，能量依旧会处于供不应求的状态。所以在无氧的条件下，肌肉借助糖原酵解的方式不但能够获得能量，还会形成大量乳酸，肌肉中出现更多的乳酸，疲劳的情况就会更加严重，而乳酸脱氢酶在乳酸代谢过程中发挥重要作用，而借助乳酸脱氢酶进行抗疲劳功能性食品的评估[8-9]。肌肉内的乳酸会在较短的时间内渗透至血液循环系统，进而导致血乳酸水平提高，进而使得肌乳酸和血乳酸水平处于相对平衡的状态。此过程所需时间大概是5 min～15 min。2 个受测试剂量组的乳酸脱氢酶水平相对于对照组来说都明显较低，并且差异存在统计学价值，这就代表红菇水提液可以抑制肌乳酸的形成，进而发挥抗疲劳的效果。

分析灌胃小白鼠的血乳酸脱氢酶水平、持续浮水时长、肝糖原水平等参数，能够对红菇水提取液对小白鼠抗疲劳效果的研究提供可靠的参考依据。