朵玉明， 何彦春

(1.甘肃省肃南县畜牧兽医技术服务中心，甘肃 肃南 734000；2.张掖市动物疫病预防控制中心，甘肃 张掖 734000)

2017年11月，张掖市动物疫病预防控制中心对甘州区3个肉牛养殖户临床检查健康的28头肉牛开展了免疫抗体检测和口蹄疫非结构蛋白3ABC检测，对口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体阳性牛间隔14 d分2次采集O-P液，开展了口蹄疫病毒核酸RT-PCR检测。现就检测过程和结果分析如下，以供广大同行参考。

1 材料与方法

1.1 样品采集

张掖市某地拟外调的肉牛共28头，分属3户养殖户，均为6～8月龄牛，临床检查健康。注射牛口蹄疫O型、亚洲I型二价口蹄疫灭活疫苗后21 d采集血清样品开展O型口蹄疫免疫抗体和3ABC抗体检测。检测结果出来后对3ABC抗体阳性的27头牛分2次采集O-P液，并开展口蹄疫病毒核酸实时荧光RT-PCR检测，2次采样间隔时间14 d。

1.2 检测试剂

口蹄疫O型正向间接血凝抗原、口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒、口蹄疫病毒通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒均为中国农业科学院兰州兽医研究所生产，批号分别为：20170802201、20171027129和20170703101。

1.3 检测方法

口蹄疫O型正向间接血凝实验被检血清稀释度从(1∶2)～(1∶2048)，其余步骤按照试剂盒说明，由张掖市动物疫病预防控制中心实验室完成检测。口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体ELISA检测完全按照试剂盒说明书进行，由张掖市动物疫病预防控制中心实验室和甘肃省动物疫病预防控制中心实验室同步进行检测。口蹄疫病毒核酸实时荧光RT-PCR检测完全按照试剂盒说明进行，由甘肃省动物疫病预防控制中心实验室完成检测。……