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IGF-1对兔脂肪干细胞增殖和成骨分化的影响

2020-01-01朱思斌许易诚尹宗生

安徽医科大学学报 2019年12期
关键词:检测

朱思斌,张 雪,江 飞,许易诚,尹宗生

传统上,治疗骨折创伤主要有手术治疗和复位外固定保守治疗,骨组织工程是近期提出和快速发展的新的治疗手段[1],相比旧的治疗方法,骨组织工程治疗过程中创伤的骨组织可以更快恢复,骨组织修复过程加快,骨折预后功能可以更快接近之前的水平。不同种子细胞的增殖能力和多功能分化潜力各不相同,在不同骨科疾病中的治疗效果差异巨大。现在常用的种子细胞有骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)。ADSCs于2001年第一次被发现,是从脂肪组织中提取的成体干细胞[2]。ADSCs起源于胚胎的中胚层,可以向多种细胞方向分化[3-4],最终分化成成骨、成脂、成软骨细胞。胰岛素样生长因子1(insulin like growth factor 1,IGF-1)是一种结构类似于胰岛素的生长因子,在调节细胞生长、促进细胞分化、促进骨与软骨的合成代谢、创伤修复过程中起着重要的作用[5]。研究[6]表明IGF-1可以促进 BMSCs的增殖和成骨分化。目前,ADSCs在体外培养下仍有生长增殖较慢,成骨分化所需时间较长的缺陷,为研究培养方法,该实验通过在培养基中加入不同浓度的IGF-1,探寻IGF-1对体外培养下ADSCs的增殖和成骨分化能力的生物学影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物6月龄SPF级健康新西兰白兔9只,雌雄不限,体质量2.0~3.0 kg,由安徽医科大学实验动物中心提供。饲养环境温度18~29 ℃,相对湿度达40%~70%,新鲜空气换气次数10次/h,气流速度≤0.18 m/s,压差25 Pa,洁净度一万级,氨浓度15 mg/m3,噪音≤60 dB,照度150~300 Lux。

1.2 主要试剂与仪器低糖DMEM培养基购自美国Hyclone公司;兔脂肪干细胞成骨诱导培养基、兔脂肪干细胞成脂诱导培养基购自美国Cyagen公司;……

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