高海娟， 刘泽东， 孙 蕊， 吴建新

（1.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江齐齐哈尔161005；2.内蒙古自治区退耕还林和外援项目管理中心，内蒙古呼和浩特010020）

苜蓿（Medicago sativa L.）有“牧草之王”的美称，其茎叶柔软，营养丰富，粗蛋白质含量高，适口性好，是家畜最为理想的饲草饲料，尤其对于奶牛，可以显著提高奶产量和乳品质。 青贮是苜蓿商品化开发利用的主要方式之一， 相对于生产干草其具有不受环境条件限制， 可最大限度地减少叶片的损失， 且能够保持青鲜饲料鲜态和大部分营养， 调节饲料季度与年度间供应平衡（陈喜梅等，2017）。 但因苜蓿青贮饲料中蛋白质含量高，缓冲能值高，碳水化合物含量低，乳酸菌数量少， 直接青贮很难获得优质青贮饲料（高海娟等，2015）。 苜蓿半干青贮或通过添加乳酸菌、 纤维素酶等添加剂进行青贮能够有效的改善青贮效果（徐炜等，2014；葛剑等，2014；王莹等，2010）。 本试验以含水量为65.79%的紫花苜蓿为原料，添加纤维素酶（0.3 g/kg）进行袋装青贮，通过测定干物质含量、粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、氨态氮含量、pH、有机酸含量（乳酸、乙酸、丙酸、丁酸）等技术指标研究不同青贮时期（45、60、75、90 d）的营养成分和发酵品质的动态变化。

1 材料与方法

1.1 试验材料 青贮原料：选择头茬初花期的紫花苜蓿， 来自黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院科研基地。

试验药品及用品：纤维素酶、聚乙烯袋、吸尘器、喷壶等。

1.2 试验设计 试验采用完全随机区组设计，设计45、60、75、90 d 共4 个贮藏时间处理， 每个处理3 次重复。

1.3 试验方法

1.3.1 青贮饲料的制作 初花期用镰刀刈割苜蓿，留茬高度6 cm，将刈割后的苜蓿在晾晒场进行晾晒后采用铡草机将苜蓿切割成3 ～4 cm 长的小段。 青贮原料多点采样带回实验室，烘干法测定含水量。 将青贮原料与添加剂纤维素酶（0.3 g/kg）搅拌均匀后装入大聚乙烯青贮袋（0.7 m×1.2 m）中，每袋20 kg，边装边踩实压紧，最后用吸尘器抽空气后用绳子扎紧，透明胶带缠绕封口，室温条件下避光保存。

1.3.2 青贮饲料营养成分的测定 烘干法60 ℃下烘干24 h 测定苜蓿原料含水量；烘干法105 ℃烘干8 h 测定干物质含量； 采用改良式凯氏定氮法测定粗蛋白质含量；采用Van Soest 的方法测定中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量。

1.3.3 青贮饲料发酵品质指标测定 取苜蓿青贮样品，准确称取20 g 后，用剪刀剪短，长度1 cm左右，加180 mL 去离子水摇匀，放入4 ℃恒温冰箱中24 h， 取出摇匀用4 层粗纱布过滤烧杯中，再用定量滤纸过滤到三角瓶中， 滤液测定pH，取测完pH 的滤液使用ICS-1100 离子色谱仪（色谱柱型号：AS23； 进样量：25 μL； 流动相：4.5 mmol Na2CO3，0.8mmol NaHCO3；流速：1 mL/min）检测滤液中的乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量，采用苯酚-次氯酸钠比色法测定氨态氮含量。

1.4 统计分析 采用Excel 和SAS 9.0 对数据进行计算和方差分析。

2 结果与分析

2.1 青贮饲料的营养成分 青贮后45、60、75、90 d 的营养成分各项指标，结果如表1 所示。

表1 不同贮藏天数苜蓿青贮饲料营养成分%

2.1.1 干物质含量 不同贮藏天数苜蓿青贮饲料的干物质含量为32.39% ～32.73%， 方差分析各处理间差异不显著（P ＞0.05）。

2.1.2 粗蛋白质含量 不同贮藏天数苜蓿青贮饲料的粗蛋白质含量为14.76% ～18.62%， 其中贮藏60 d 粗蛋白质含量最高，为18.62%，贮藏90 d最低，为14.76%，贮藏45 d 和75 d 粗蛋白质分别为15.17%和15.36%，方差分析结果，贮藏60 d 青贮料粗蛋白质含量与其他贮藏时间粗蛋白质含量差异均显著（P ＜0.05），贮藏45、75、90 d 之间粗蛋白质含量差异不显著（P ＞0.05）。

2.1.3 中性洗涤纤维含量 不同贮藏天数青贮料的中性洗涤纤维含量为32.25% ～41.64%， 贮藏45 d 中性洗涤纤维含量为32.25%， 贮藏60 d 中性洗涤纤维含量升高至41.64%， 贮藏75 d 和95 d后降到37.30%和38.19%。 方差分析结果， 贮藏60 d 中性洗涤纤维含量与贮藏45、75 d 和95 d中性洗涤纤维含量差异均显著（P ＜0.05）。

2.1.4 酸性洗涤纤维含量 贮藏45 d 的青贮饲料酸性洗涤纤维含量为28.44%， 贮藏60 d 酸性洗涤纤维含量降至26.43%， 随着贮藏天数的增加， 酸性洗涤纤维含量呈明显的上升趋势， 贮藏75 d 和95 d 升高到32.28%和32.57%。 方差分析结果， 贮藏45、60 d 和贮藏75、95 d 的酸性洗涤纤维含量差异性显著 （P ＜0.05）， 贮藏45 d 和60 d 的酸性洗涤纤维含量差异不显著 （P ＞0.05）， 贮藏75 d 和贮藏95 d 酸性洗涤纤维含量差异不显著（P ＞0.05）。

2.2 青贮饲料的发酵品质 青贮后45、60、75、95 d 的发酵品质指标，结果如表2 所示。

表2 不同贮藏天数苜蓿青贮饲料发酵品质

2.2.1 氨态氮含量 不同贮藏天数青贮料氨态氮含量为4.15% ～9.30%，其中贮藏45 d 和60 d 氨态氮含量比较偏低，分别为4.16%和4.15%，随着贮藏时间的推移，氨态氮含量明显增加，贮藏75 d 增加到8.14%，贮藏90 d 高达9.30%，说明蛋白质降解的速度加快。方差分析，贮藏75、90 d 氨态氮含量与贮藏45、60 d 差异显著（P ＜0.05）。

2.2.2 有机酸含量 不同贮藏时间青贮料乳酸含量为2.92% ～4.01%，青贮60 d 乳酸含量最高，为4.01%，青贮90 d 最低，为2.92%，青贮45、75 d 乳酸含量分别为3.70%和3.92%， 随着贮藏时间的推移， 乳酸含量呈现先升高后降低的规律。 方差分析， 青贮90 d 乳酸含量与青贮45、60、75 d 乳酸含量差异性显著（P ＜0.05），其他贮藏时间之间乳酸含量差异性不显著（P ＞0.05）。

苜蓿青贮45、60、75、90 d 乙酸含量分别为0.86%、0.72%、0.76%、0.75%，方差分析，不同贮藏时间乙酸含量差异不显著（P ＞0.05）。

不同贮藏时间苜蓿青贮料丙酸含量为0.55%～0.73%，青贮60 d 丙酸含量最低，为0.55%，青贮75 d 丙酸含量最高，为0.78%，青贮45、90 d 丙酸含量分别为0.70%和0.73%，方差分析，各贮藏时间丙酸含量差异不显著（P ＞0.05）。

青贮45、60 d 苜蓿没有检测到丁酸， 青贮75 d丁酸含量为0.06%，青贮90 d 丁酸含量为0.19%，方差分析，青贮90 d 丁酸含量与青贮45、60、75 d差异显著（P ＜0.05），其他贮藏时间之间丁酸含量差异不显著（P ＞0.05）。

3 结论与讨论

原料的含水量是苜蓿青贮效果的关键因素之一， 过高和低水分青贮效果均不佳。 陈喜梅等（2017） 研究发现， 苜蓿青贮最适含水量约为70%；聂柱山（1990）研究表明，青贮原料水分含量控制在60% ～68%为宜。 本试验中苜蓿青贮原料含水量为65.79%，这个含水量保证了青贮饲料发酵的品质。

添加纤维素酶能够有效改善苜蓿青贮饲料的营养价值和发酵品质。 邓艳芳等（2008）报道，在青贮过程中添加纤维素酶能将青贮原料的结构性碳水化合物降解为单糖或双糖，为青贮发酵提供更多可供利用的底物，加速乳酸菌在青贮早期的繁殖， 使青贮pH 快速降低。 万里强等（2011）研究表明，苜蓿青贮时添加纤维素酶能降低青贮料的氨态氮含量和保存更多的粗蛋白质以及生成更多的乳酸。薛艳林等（2010）应用纤维素酶进行青贮发现，苜蓿青贮饲料的pH 和氨态氮含量，极显著低于对照组（P ＜0.01），乳酸含量显著高于对照组（P ＜0.05），发酵品质和饲用价值均得到改善。 本青贮试验中添加纤维素酶，添加量为0.3 g/kg。

不同贮藏天数粗蛋白质含量为14.76% ～18.62%， 贮藏60 d 粗蛋白质含量最高，为18.62%， 贮藏60 d 与其他3 个贮藏时间粗蛋白质含量差异均显著（P ＜0.05）；不同贮藏天数青贮料的氨态氮含量为4.15% ～9.30%，贮藏45 d和60 d 氨态氮含量低， 分别为4.16%和4.15%，随着青贮天数的增加， 氨态氮含量明显增加，75 d增加到8.14%，90 d 后高达9.30%； 苜蓿青贮料pH 随着青贮天数的延长呈现由高到低再升高的过程，贮藏60 d 的pH 最低，为4.54；乳酸含量随着贮藏时间的推移， 呈现先升高后降低的规律，青贮60 d 乳酸含量最高，为4.01%。青贮45、60 d 的苜蓿没有检测到丁酸，青贮75、90 d 丁酸含量分别为0.06%和0.19%。

粗蛋白质含量、氨态氮含量、pH、乳酸含量、丁酸含量是评判苜蓿青贮品质主要关键性指标。青贮饲料粗蛋白质含量越高， 氨态氮含量越低，说明青贮饲料中蛋白质及氨基酸的分解程度越低，青贮质量越好。 乳酸含量越高，丁酸含量越低，青贮以乳酸发酵为主，pH 也就越低，青贮质量也就越好（高海娟等，2017；许庆方等，2006；郭旭生等，2005）。本试验中选取4 个贮藏时间中贮藏60 d 粗蛋白质含量和乳酸含量最高，pH 和氨态氮含量最低，没有检测到丁酸。综合各项指标，贮藏60 d 紫花苜蓿青贮饲料的营养价值和发酵品质好于其他3 个贮藏时间。