张莉，魏殿华，齐亚银

（石河子大学动物科技学院 新疆石河子 832000）

绵羊肺炎支原体（MO）的感染又称绵羊传染性胸膜肺炎，MO 是一种介于细菌与病毒之间的无细胞壁结构的原核微生物，国外1963 年首次从患间质性肺炎的绵羊中分离得到该病原，我国于1979 年首次从患肺炎的绵羊肺脏中分离得到该病原。该病主要引起绵羊的一种以咳嗽、喘气、渐进性消瘦以及肺间质的增生性炎症为主要特征的慢性呼吸道传染病。近年来，绵羊肺炎支原体的感染在我国主要绵羊养殖区，例如河北、山西、内蒙古、甘肃、宁夏、新疆等地区频繁发生，给我国养羊业带来极大的危害，且严重阻碍了我国养羊业的健康持续发展[1,2]。

免疫接种是控制绵羊支原体肺炎的重要手段之一，但目前尚无商品化疫苗，临床生产中主要依靠环境控制和药物治疗来控制该病的发生，而且临床生产中经常会出现绵羊肺炎支原体和其他细菌的混合感染，增加了科学防控该病的难度[3,4]。前期调研发现，北疆某规模化羊场存在疑似绵羊肺炎支原体的感染，各种年龄阶段的羊只均有零星咳嗽，体温轻度升高，腹式呼吸比较明显，为了查明是否存在绵羊肺炎支原体的感染及程度，本试验采集不同日龄的血液，分离血清，选择绵羊肺炎支原体抗体和抗原检测ELISA 试剂盒，进行该病的血清流行病学调查，以给本场提供一个科学有效的综合防控方案。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 样品的采集与处理对北疆某规模化羊场不同年龄阶段的绵羊（湖羊）进行颈静脉采血。分别为10～30 日龄，16 只；30～60日龄，18 只；60～120 日龄，14 只；成年雌性绵羊，24 只；成年雄性绵羊，6 只。将采集好的绵羊血液静置于室温自然析出血清。待血清析出后3000r/min 离心5min，取上清于离心管中，置于4℃或-20℃保存。

1.1.2 主要试剂与仪器 绵羊肺炎支原体抗体检测试剂盒、绵羊肺炎支原体抗原检测试剂盒均购自美国TSZ 公司；酶联免疫检测仪购自美国GENE 有限公司；微量移液器购自德国Eppendorf 公司。

1.2 试验方法

绵羊肺炎支原体抗原、抗体检测方法按照试剂盒说明书严格操作。绵羊肺炎支原体抗体/抗原检测结果判定标准：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00；阴性对照平均值≤0.10；临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15；阴性判定：样品OD 值＜临界值（CUTOFF）为肺炎支原体抗体/抗原阴性；阳性判定：样品OD 值≤临界值（CUT OFF）者为肺炎支原体抗体/抗原阳性。

2 试验结果

从图1 可以看出，不同阶段的绵羊肺炎支原体抗体阳性率平均为67.95%，最高的为成年母羊，为79.17%，最低的是10～30 日龄羔羊，为43.75%；不同阶段的绵羊肺炎支原体抗原阳性率平均为41.03%，最高的为60～120 日龄的羔羊，为71.43%，该阶段咳嗽、喘气的羊只较多，最低的为成年公羊和母羊，为16.67%。

表1 不同阶段绵羊血清中MO-Ab和MO-Ag检测结果表

图1 不同阶段绵羊血清中MO-Ab 和MO-Ag 检测结果分析图

3 讨论

剡文亮等[5]研究发现，新疆北疆玛纳斯、奇台、石河子等地绵羊MO 抗体阳性率为46.66%～100%，MO 抗原的阳性率为26.66%～100%，其中个别散养场野毒感染达到100%，远远高于本试验结果中该规模化羊场的野毒感染现状，可能规模化与散养模式的管理、营养、防疫等现状有关。

本试验绵羊肺炎支原体抗体检测结果表明，抗体的野毒感染率为67.95%，但抗原的阳性率为41.03%，其中成年绵羊的抗原和抗体阳性率吻合率不高，说明成年绵羊存在早期支原体野毒感染现象，但机体免疫系统已经将病原清除；各个阶段羔羊的抗体和抗原阳性率吻合率较高，存在绵羊肺炎支原体正在感染的可能。

绵羊支原体肺炎作为一种主要影响羔羊生产性能的疫病，目前已经威胁到我国各个不同地区的羊场，有关该病的进一步研究，尤其是疫苗的开发迫在眉睫，另外养殖模式、养殖水平的层次不齐也是导致该病多发的主要因素，为了科学的防控该病的发生，应该建立一套集营养保健、免疫接种、环境控制和早期干预治疗的综合防控措施[6]。