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免疫组化病理技术质量控制管理的应用效果观察

2019-11-28林雪松

中国医药指南 2019年29期
关键词:切片免疫组化冲洗

林雪松

(辽宁省锦州市中心医院放疗科,辽宁 锦州 121001)

免疫组化病理技术在医院检验科中极其常见,其是对病理组织进行检查的一项重要技术。其能够为临床诊断以及治疗提供准确的参考依据,对提高临床诊断的准确率以及临床治疗效果等均有着非常重要的意义[1]。本次选取了160例2018年2月至2019年1月在我院治疗的患者,取其胃肠组织病理化分析的样本,对其中80例患者的病理组织样本采用质量控制管理后制作病理切片,对免疫组化病理技术质量控制中存在的问题,并提出相应的对策。具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料:选取160例2018年2月至2019年1月在我院治疗的患者,取其胃肠组织病理化分析的样本,本次选取的所有病理组织样本均来自于我院病理活检室,按照制片质量控制的情况将其分成了观察组和对照组,每组均有病理组织样本80份。对两组病理组织的状态进行比较后发现其没有明显差异(P>0.05),有可比性。

1.2 试剂及仪器:本次研究中所使用的甲醛、苏木精、二甲苯、无水乙醇、硫酸铝、碘酸钠、石蜡以及与本次免疫组化试验相关的试剂均为市场上常见的试剂,本次研究的仪器包括转轮式组织切片机【型号:徕卡RM2235】、全自动组织脱水机、生物组织摊烤片机、包埋机、干燥箱【生产企业:天津市泰斯特仪器生产公司;型号:202-1AB型恒温干燥箱】、图像分析仪【型号:日本OLYMPUS BX41+Imagepro plus】等。

1.3 方法:对照组给对照组组织样本采用常规方法制作病理组织切片。具体如下:①固定标本。在组织标本采集后的30 min内将其放置在固定液中保存,再取体积是此固定液体积4~10倍的浓度为10%的甲醛溶液,将组织标本放入其中固定8~24 h。②将经过固定的组织标本进行抗原修复,本次采用了热修复法,将抗原修复中的温度控制在100 ℃及以上,将修复的时间控制在3~15 min,将修复液的pH值控制在7.5~8.5。③对经过修复的本组病理组织标本进行脱蜡处理,均匀的增加试剂,为了避免边缘效应的发生,要控制好试剂的面积,使其比切片组织的界线宽出0.05~0.35 cm。对组织标本在浸液时的温度以及烘烤切片时的温度要合理的控制。

观察组给观察组组织样本采用质量控制管理后制作病理切片。具体如下:①在室温下,将本组组织标本进行脱蜡切片,并将其浸泡在浓度为3%双氧水中20 min,取出后用磷酸盐缓冲液进行冲洗,5 min/次,连续冲洗3次。②取pH值为6.0的柠檬酸缓冲液700 mL,将其放入1000 mL的烧杯中加热,然后将做好标记的CK19抗体、Ki-67抗体、HBcAg抗体、HBsAg抗体的切片放在加热至沸腾的烧杯中,15 min后,在每一个切片上滴加一抗后,将其放在40 ℃的冰箱中孵育。③取pH值为7.4的PBS冲洗液,对切片进行冲洗,5 min/次,持续冲洗3次。④在室温下,取二抗溶液分别滴加在每一个切片上孵育15 min,取pH值为7.4的PBS冲洗液,对切片进行冲洗,5 min/次,持续冲洗3次。⑤取DAB显色剂,将切片放入5~10 min后,取苏木精对切片进行衬染、水洗,最后进行封固。

1.4 观察指标:观察并比较两组病理组织切片的有效制片率。评价:当切片编号清晰、薄厚度适宜、色彩鲜亮、对比明确则判断为优质片;当切片编号清晰、但是出现较少的褶皱,没有出现污染和活气泡、色彩比较鲜亮则判断为良质片;当切片编号不清晰、褶皱或者气泡比较多,不利于临床观察则判断为差质片。

1.5 统计学分析:采用SPSS19.0统计软件处理数据,计数资料用χ2检验,用%表示,当P<0.05时,表示差异有统计学意义

2 结果

对两组病理组织切片的有效制片率进行比较。经过不同的制片技术质量管理后,在有效制片率方面,观察组(97.50%)优于对照组(78.78%),差异明显(P<0.05),有统计学意义。见表1。

表1 两组病理组织切片的有效制片率比较

3 讨 论

免疫组织化学技术在检验科比较常见,其是检验科进行病理学组织检查的一项重要技术[2]。其能够有效的对病理组织切片的制作质量进行严格的控制,同时也是提高临床病理学组织检查结果准确性的关键因素[3]。本次研究结果显示,观察组病理组织切片的有效制片率(97.50%)优于对照组(78.78%),差异明显(P<0.05),有统计学意义,这与李楣[2]的研究结果是一致的。但是目前,临床上在进行免疫组织化病理技时,就遇到一些问题,如选材、切片、试剂盒的染色等,任何一种问题都会导致免疫组织化病理检验结果出现差异。总之,在对病理组织进行检查时,采用有针对性的质量控制管理,能够为临床诊断和治疗均提供准确的依据,建议将其推广在更多的临床上。

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