程雪莲

(南阳市中心医院儿科，河南 南阳473000)

近年来，新生儿败血症的发生率明显的上升，特别是在合并有自身免疫力下降的新生儿中，新生儿败血症的发病率具有进一步的上升趋势[1]。流行病学研究证实，新生儿败血症的每年新发病例数量可超过10万新生儿左右[2]。现阶段临床上缺乏对于新生儿败血症病情评估的血清学指标，而可靠的评估指标对于疾病的临床预后的评估或者高危新生儿的随访均具有重要的价值。Toll样受体4(Toll like receptor 4，TLR4)的表达能够促进自身免疫性损伤，加剧氧化应激功能障碍，提高患者体内的重要内脏组织的损伤程度[3,4]；淀粉酶A蛋白(amylase A protein，SAA)的高表达，能够诱导下游炎症信通路的激活，促进IL-6或者肿瘤坏死因子a的富集，从而促进新生儿败血症的病情进展[5]。为了揭示TLR4、SAA水平在新生儿败血症中的变化及与心肌、肝功能受损的关系，从而为临床上新生儿败血症的病情评估提供可靠的血清学参考指标，本次研究选取我院2016年6月～2017年12月确诊的败血症新生儿90例，揭示了不同指标的血清学变化。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院2016年6月-2017年12月确诊的败血症新生儿90例 (病例组)、90例健康新生儿(对照组)。 病例组，日龄 3～14d，平均 7.7±2.6d，男 48例、女 42例，分娩孕周 36～40周，平均38.4±1.7 周，出生体质量 3104.2±177.6g。 对照组，日龄 3～14d，平均 7.2±2.4d，男 50 例、女 40 例，分娩孕周36～40周，平均38.2±1.3周，出生体质量3122.3±181.9g。两组患儿的年龄、性别、分娩孕周、出生体质量比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

纳入标准：(1)新生儿败血症的诊断标准参考中华医学会制定的标准；(2)分娩孕周36～40周；(3)经血培养证实为细菌感染性败血症；(4)对照组为我院出生的健康新生儿。排除标准：(1)宫内窘迫；(2)染色体及出生缺陷；(3)伴有免疫性疾病；(4)合并宫内感染。

1.2 检测方法 所有受试者于清晨抽取空腹静脉血 8 ml， 其中 2 ml置于 Eppendorf管中在 4℃，3000 r/mi条件下离心10 min，吸取上层血清，-80℃冰箱保存，采用ELISA试剂盒测定SAA的含量；4ml静脉血用全自动生化分析仪测定ALT、AST、TBIL、GGT；2mL 静脉血采用免疫发光法检测cTnI、cTnT、CK-MB、H-FABP， 配套试剂购自罗氏检测公司。采用RT-PCR法检测TLR4mRNA的表达，RNA提取试剂盒购自南京碧云天生物公司，离心机3K15购自德国西格玛公司。

1.3 统计学方法 统计分析采用SPSS16.0数据分析软件，计量数据的正态分布检验采用pp图和qq图，计量资料采用()表示，数据统计分析采用t检验；计数资料采用χ2检验；相关性分析采用Pearson线性相关分析法；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组新生儿血清SAA、TLR4mRNA水平比较病例组患儿的血清SAA、TLR4mRNA水平显著的高于对照组(P＜0.05)；见表 1。

2.2 两组新生儿肝功能指标比较 病例组患儿的血清ALT、AST、TBIL、GGT水平显著的高于对照组(P＜0.05)；表 2。

表1 两组新生儿血清SAA、TLR4mRNA水平比较()

表1 两组新生儿血清SAA、TLR4mRNA水平比较()

组别 n SAA(mg/L)TLR4mRNA(-2△ct)病例组对照组t值P值90 90 73.2±21.8 4.9±1.3 29.670 0.000 1.83±0.42 0.39±0.13 31.072 0.000

表2 两组新生儿肝功能指标比较()

表2 两组新生儿肝功能指标比较()

组别 n ALT(IU/L)AST(IU/L)TBIL(μmol/L)GGT(IU/L)病例组对照组t值P值90 90 97.5±23.6 28.3±7.5 26.626 0.000 122.7±29.8 27.6±8.9 29.009 0.000 87.4±18.3 36.2±4.9 25.639 0.000 106.4±28.1 21.6±5.8 28.038 0.000

2.3 两组新生儿心肌损害指标比较病例组患儿的血清 cTnI、cTnT、CK-MB、H-FABP 水平显著的高于对照组(P＜0.05)；见表 3。

表3 两组新生儿心肌损害指标比较()

表3 两组新生儿心肌损害指标比较()

组别 n cTnI(ng/ml)cTnT(ng/ml)CK-MB(IU/L)H-FABP(ng/ml)病例组对照组t值P值90 90 0.98±0.26 0.24±0.09 26.895 0.000 0.82±0.44 0.11±0.05 15.210 0.000 72.31±24.91 16.88±2.90 20.969 0.000 49.33±13.51 7.40±2.81 28.827 0.000

2.4 败血症患儿血清SAA、TLR4mRNA水平与肝功能指标的相关性 病例组患儿的血清SAA、TLR4mRNA 与血清 ALT、AST、TBIL、GGT 呈显著的正相关关系(P＜0.05)；见表 4。

2.5 败血症患儿血清SAA、TLR4mRNA水平与心肌损害指标的相关性 病例组患儿的血清SAA与血清 ALT、AST、TBIL、GGT 呈显著的正相关关系(P ＜0.05)，TLR4mRNA 水 平 ALT、AST、TBIL、GGT的相关性无显著性(P＞0.05)；见表5。

表4 败血症患儿血清SAA、TLR4mRNA水平与肝功能指标的相关性()

表4 败血症患儿血清SAA、TLR4mRNA水平与肝功能指标的相关性()

指标 相关值 ALT AST TBIL GGT SAA TLR4mRNA r值P值r值P值0.673 0.000 0.722 0.000 0.673 0.000 0.722 0.000 0.583 0.000 0.618 0.000 0.592 0.000 0.629 0.000

表5 败血症患儿血清SAA、TLR4mRNA水平与心肌损害指标的相关性()

表5 败血症患儿血清SAA、TLR4mRNA水平与心肌损害指标的相关性()

指标 相关值 ALT AST TBIL GGT SAA TLR4mRNA r值P值r值P值0.539 0.000 0.192 0.096 0.618 0.000 0.204 0.083 0.639 0.000 0.087 0.317 0.702 0.000 0.117 0.296

3 讨论

在早产儿或者合并有新生儿呼吸窘迫综合症的患儿中，新生儿败血症的发生风险均可以显著的上升[6]。新生儿败血症的发生，具有下列几个方面的特点[7,8]：(1)新生儿败血症的病情进展较为迅猛，短期内可导致严重的肝肾功能及心肺功能障碍；(2)其对于临床保守性药物治疗的总体敏感性较低，治疗后的多器官功能恶化仍然较为明显。现阶段临床上缺乏对于患者临床预后评估过程中的可靠参考指标，虽然影像学检查或者常规生化检查能够在一定程度上评估患者的病情转归，但其评估的灵敏度或者特异度等指标并不理想。例如一项囊括了327例样本量的新生儿败血症的血清学指标分析可见，C反应蛋白(CRP)虽然能够在一定程度上评估新生儿败血症的发生风险，并评估新生儿败血症患者的远期临床转归，但其预测患儿临床转归的灵敏度不足35%，预测的一致性率不足40%[9]。

SAA作为血清学非特异性的炎症时相蛋白，SAA的上升能够诱导炎症信号通路MAPK的激活，促进下游炎症因子如IL-10或者IL-4的显著释放，促进了中性粒细胞对于心肌细胞组织的浸润，增加了心肺功能异常的风险。基础领域的相关研究证实，SAA还能够影响患者体内的氧化应激指标如谷胱甘肽芳基转移酶的活性，导致氧化应激反应的激活，促进了肝肾上皮细胞的氧化应激性损伤[10]；TLR4的表达能够通过激活自身的T淋巴细胞免疫，导致自身免疫功能的过度激活，从而参与到感染性疾病或者自身免疫性疾病的发生过程中。相关研究也显示，TLR4能够在提高炎症因子的转录反应速度等方面发挥作用，促进肿瘤坏死因子又对于新生儿感染部位的组织损伤[11,12]。

本次研究中SAA、TLR4mRNA在新生儿败血症患者血清中均明显的高表达，高于非败血症组，差异较为明显，提示了SAA、TLR4mRNA在促进新生儿败血症过程中的作用，荟萃国内外的相关文献，笔者认为相关指标对于新生儿败血症发生的影响主要考虑与下列因素有关[10，13，14]：(1)SAA 的上升能够诱导中性粒细胞的激活，促进单核细胞对于内脏组织器官的损伤，导致感染性病情的进展；(2)TLR4mRNA的上升能够增加TLR4的转录翻译水平，促进T淋巴细胞的自身免疫性损伤过程。李松等[15]研究者探讨了新生儿感染性疾病的血清学资料，发现SAA的上升幅度可超过28%以上，同时在累及器官较多或者感染性病情短期进展速度较快的人群中，SAA的表达可进一步的上升。谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBIL)等指标是评估患儿肝功能的指标，本次研究中ALT、AST、TBIL等在病例组患儿中均明显的上升，高于对照组，差异明显，提示了新生儿败血症均存在明显的肝功能的损伤，这主要考虑与肝脏上皮细胞的炎症性损伤或者氧化应激损伤过程有关。肌钙蛋白I(cTnI)、肌钙蛋白T(cTnT)、磷酸肌酸同工酶(CK-MB)等是评估患儿心肌细胞损伤的重要指标，在病例组患儿中，心肌酶谱相关指标均明显的上升，提示了新生儿败血症患儿均存在不同程度的心肌细胞的损伤。相关关系分析可见，SAA、TLR4mRNA的表达与新生儿的肝功能指标密切相关，提示SAA、TLR4mRNA在影响到患儿的肝功能损伤过程中发挥了重要的作用，这主要由于SAA、TLR4mRNA的高表达能够影响到肝脏上皮细胞的凋亡程度，促进炎症信号通路NF-KB的激活有关；而病例组患儿的血清SAA与肌钙蛋白I、肌钙蛋白T、磷酸肌酸同工酶等心肌酶谱指标呈显著的正相关关系，提示了SAA指标与患儿心肌细胞损伤的相关性，这主要由于SAA蛋白的表达能够影响心肌细胞膜完整性，促进了心肌细胞的线粒体损伤。