周碧云 ,张玲 ，巫小莉 ，肖鸿岸 ，曾紫婷

(1.广州金域医学检验中心，广东广州51000，2.广州中医药大学金沙洲医院，广东广州510168，3.广东医学院，广东东莞523808)

Sysmex XN-1000是一台全自动五分类的血液分析仪,全血细胞检测,有全血和预稀释血两种检测模式。血小板检测，有电阻法和光学法(RET通道)。根据 《中华人民共和国卫生行业标准WS/T406-2012》[1]血液分析仪不同检测模式的结果可比性要求，对两种检测模式结果的可比性和一致性进行评价；对检测血小板的两种方法电阻法和光学法进行性能评价，报告如下。

1 资料与方法

1.1 仪器与试剂 Sysmex XN1000全自动血液分析仪；配套试剂、校准物名称：XN-CAL,批号：63130525； 质 控 物 批 号 ： (H、N、L)63611101、63611102、63611103； 广州阳普公司：2mg/ml EDTA-K2抗凝管

1.2 一般资料 ① 据《WS/T406-2012》要求，按标本数量比例选择20例广州中医药大学金沙洲医院门诊部与住院部病人的新鲜抗凝全血标本；②血小板大于400×109/L的临床样本15例；红细胞MCV小于65fl且血小板直方图异常的临床样本100例。

1.3 方法

1.3.1 仪器的准备：按《中华人民共和国卫生行业标准WS/T406-2012》临床血液学检验常规项目操作要求仪器进行验证，内容包括：精密度、携带污染率、线性、参考区间验证、准确性、可比性等，各项均达到国家行业标准；

1.3.2 每天质控(高、中、低)数据均在±2SD之内；

1.3.3 实验操作 ①全血细胞两种检测模式的比较：a.全血检测模式：20例临床样本测定白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板，每例样本计数两次取均值；b.预稀释模式：上述20例标本，每例取20μl血加到120μl稀释液中，同时稀三管，混匀后检测(目的：减少误差)。每份标本检测两次取均值；两种检测模式所测得的均值，分别计算白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板计数等的相对偏差；②血小板两种检测方法(电阻法和光学法)的评价：高值血小板(＞400×109/L)的临床样本 15例；红细胞 MCV 小于65fl且血小板直方图异常的临床样本100例，同时用电阻法和光学法检测血小板，比较两种方法学对异常样本血小板计数的准确性。

1.3.4 离群值检验和按EP9-A2文件要求对方法内和方法间所有标本的测定值进行离群值检验，按照公式分别计算方法内绝对偏差、相对偏差和方法间绝对偏差、相对偏差，可接受限是上述偏差的4倍。如果一个标本同时超出了绝对偏差和相对偏差的可接受限，判断为离群点。

1.3.5 统计方法 ①全血细胞两种检测模式的比较：参照《WS/T406-2012》中表8可比性验证的允许偏差及比对样本的浓度要求，计算两种检测模式结果的相对偏差，与允许偏差作比较，判断两种检测模式是否具有可比性；②血小板两种检测方法的评价：采用t检验和Z检验：评价血小板两种检测方法。

2 结果

2.1 离群点判断 4个检测项目方法内和方法间的可接受限结果见表1。经过判断，本次实验种各项目未见离群点，说明仪器精密度良好，所获数据可以进行下一步分析。

2.2 两种检测模式检测结果的相对偏差 仪器校准后，两种检测模式的各项结果达到行业标准，偏差在允许范围内。见表2。

2.3 Wilcoxon符号秩检验结果 电阻抗法和光学法两通道，高值血小板的计数无统计学意义 (P＞0.05)；红细胞平均体积小于65fl组的血小板计数有统计学意义(P＜0.05)。 见表3。

表1 各项目重复测量方法内和方法间可接受限

表2 两种检测模式检测结果的相对偏差

表3 RBC小MCV组及高值血小板组资料Wilcoxon符号秩检结果

3 讨论

血细胞分析,以静脉全血检测的准确性最高，各医院检验科大部分用全自动全血模式进行血细胞检验，但由于某些特殊原因，比如婴幼儿、长期化疗病人、血管难抽血等人群，不能依靠静脉全血模式检测时，就要对患者静脉全血或末梢血作预稀释处理，在预稀释模式下检测。Sysmex XN-1000全自动血液分析仪，由于两种检测模式分别采用各自的校准因子，虽然通道与方法学一样，但稀释比不一样，计数的细胞数不一样，容易造成结果出现偏倚或误差，给临床诊治带来困扰，给患者带来不信任感。如何减少不同检测模式之间的偏倚和误差，保证两种检测模式结果的准确性、可比性和一致性，是质量保证的重要措施与前提。因此，比较这两种模式检测结果的一致性，探讨其检验结果的可比性显得非常重要[2-5]；参照《中华人民共和国卫生行业标准WS/T406-2012》文件要求进行选择临床标本和设计实验，以全自动模式作为参比方法，预稀释模式作为实验方法，进行仪器校准后的数据分析。仪器校准后的白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板四个参数，按照CLSI EP9-A2文件要求，计算WBC、RBC、Hb和PLT四个项目的可接受限，判断离群点，结果显示4个项目在两次重复测定方法和参比方法间，均无超出点和离群点，提示Sysmex XN-1000精密度好，获得的试验数据可以进一步用于统计分析[1-6]。表2结果显示，两种检测模式的结果具有可比性，均达到了行业标准《WS/T406-2012》，符合使用不同的检测程序测定某种分析物获得的检测结果间的一致性，结果间的差异不超过规定的可接受标准时，可认为结果具有可比性[1]的要求。

Sysmex XN-1000全自动血液分析仪检测血小板，常规通道采用电阻抗法，仪器在2～30fl范围内分析血小板，在25～250fl范围内分析红细胞，两者分析范围间有交叉重叠处。在血小板直方图正常及无干扰的情况下，电阻抗法和光学法两通道的高值血小板计数，无统计学意义(P＞0.05)；当红细胞平均体积小于65fl，血小板直方图异常时，仪器会将体积小于30fl完整的小红细胞及红细胞碎片当血小板计数[2-10]，因而会影响血小板检测的准确性，血小板计数无统计学意义差异(P＜0.05)；因此建议，当血小板直方图异常，红细胞体积小于65fl时，建议使用光学法检测血小板，因为光学法是通过荧光染色[8]识别血小板，可以在一定程度上减少红细胞碎片及小红细胞等因素对电阻法血小板计数时的干扰，并可计数大血小板，使结果更接近于真值。

Sysmex XN1000是多功能全自动血液分析仪，具有全血检测和预稀释血检测模式，血小板计数有电阻法和光学法。由于检测模式与方法学不同，如果一台仪器检测结果不一致，不但给临床治疗带来困扰，同时也会引起临床和患者对我们结果准确性的质疑，严重的可能会引起医疗纠纷，应该引起重视。如何减少不同检测模式、不同方法学之间结果的误差，实现一份样本不同检测模式结果的可比性和不同检测方法结果的准确性，是实验室质量管理的重要内容之一。因此，要保证检测结果的可比性、准确性和一致性，实行定期比对是保障仪器最终测定结果准确性的关键所在，是室内质量控制的延伸和完善。