不同年龄SD大鼠脾脏组织显微结构观察

2019-10-24黄静郭洋项涛吴大鹏陈丹杨正伟李阳友

实验动物与比较医学 2019年5期

黄静, 郭洋, 项涛, 吴大鹏, 陈丹, 杨正伟, 李阳友

(川北医学院1. 实验动物中心; 2. 形态定量研究室; 3. 动物发育研究室; 南充 637000)

脾脏具有造血、滤血、储血及免疫等重要功能。结构是功能的基础, 脾脏自身的结构, 随着年龄阶段的不同, 存在很大差异, 早期的大鼠脾脏结构不完整, 至3月龄时各种结构才具有典型组织学形态[1]。但是很少有大龄大鼠脾脏的组织结构特点报道。本文拟研究正常大鼠脾脏3年内的组织结构显微特点变化情况, 观察脾内各种结构的显微变化, 为未来相关研究提供方法和数据参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物与脾脏取样

SPF级新生雄性SD大鼠228只购自川北医学院实验动物中心[SCXK(川)2013-18]。分别在不同发育生长阶段(1日龄、1月龄、3月龄、6月龄、12月龄、24月龄和36月龄)随机取7只, 称量大鼠体质量, 腹腔注射3%戊巴比妥(50 mg/kg)麻醉,取下完整脾脏, 用电子天平(日本A＆D Company，HR-120 型，精度0.1 mg)称量脾脏的重量，并用已知密度的不同浓度蔗糖或乙醇溶液测量脾脏的密度，该动物脾脏的总体积可由所得脾脏的重量除以密度得到[2,3]。脾脏放入配置好的Bouin液内浸润固定2 d后，放入体积分数70%乙醇溶液固定保存(4℃冰箱)备用。

1.2 切片制备

脾脏组织块经Bouin液固定, 乙醇和正丁醇脱水后，包埋于甲基丙烯酸树脂中，从包埋块中切取出1张20 μm厚的切片(半自动切片机-德国Leica Biosystems GmbH的RM2235型和钨钢刀)，最后用过碘酸-席夫试剂(PAS)和苏木精进行染色。采用日本Olympus的BX53型生物显微镜观察。