赵杨

摘 要 本实验用20%ABS红色塑胶液灌注牛蛙主动脉和肺动脉，待定型后，经过37%的盐酸腐蚀，自来水冲洗及人工修整等过程，制作出牛蛙心肝肺血管聯合铸型标本。在腐蚀过程中，牛蛙的其他组织被腐蚀掉，仅剩下心肝肺的管道铸型，从而制作出了既显示心肝肺原有的形态，又可以清楚地观察到心肝肺血液循环系统的血管铸型标本。该标本为更加深入对牛蛙心肝肺血管的研究提供了重要的材料依据，具有重大意义。

关键词 牛蛙；心肝肺；铸型

铸型标本可以用来研究各管道器官特别是血管系统复杂的位置关系和分布情况，是展示生物体全身各器官管道概况的标本，具有三维立体感强、构型美观、色泽鲜艳的显著特点，在临床、科研、解剖学研究和教学等方面有其独到之处。

牛蛙（Bull frog）原产于美国东部数州，后被引进西部各州和其他国家，1959年我国引进牛蛙驯养，1986年在我国中部和南部大量饲养。体绿或棕色，腹部白色至淡黄色，四肢有黑色条纹。体长约20cm，后肢长达25cm。成体大者体重超过0.5kg。常生活于静水中或其附近。春季繁殖，卵产于水中。蝌蚪呈绿褐色带有深色斑点。蝌蚪阶段持续1-3年，决定于气候条件。许多牛蛙可供食用或用作实验材料。

实验部分

1 制作器械和材料准备

1.1 器材和药品

止血钳，镊子，剪刀，大方盘，自制套管，大头针，蛙板，棉球，量筒，托盘天平，塑料注射器（10ml， 20ml），烧杯（10ml ，40ml，50ml 和1000ml），耐酸缸，缝线；乙醚（上海市马陆制药厂生产），丙酮（上海化学试剂总厂生产），ABS塑料，盐酸（重庆川江试剂厂生产），颜料（上海马利牌）。

2 试验前准备和试验操作

2.1 试验前的准备

选用20%ABS丙酮溶液作为填充剂。该填充剂的配方为20.00gABS塑料，100.00ml丙酮和适量红色颜料。它的配置操作为首先用量筒量取丙酮100.00ml并且转移入合适的试剂瓶中，用托盘天平准确称取ABS塑料20.00g，投入到盛有100.00ml丙酮的试剂瓶中，充分摇匀后加入适量红色颜料（上海马利牌），约2.5h后，ABS颗粒完全溶解在丙酮溶液里，即配置成浓度为20%的红色ABS丙酮溶液。

2.2 试验过程

2.2.1 麻醉

将蘸取乙醚的棉球与牛蛙一起放入1000ml的烧杯中，倒置烧杯。待牛蛙出现规则的胸腹式呼吸，全身肌肉松弛，胸腹式呼吸，全身肌肉松弛，眼睑、角膜、结膜的反射变弱，表明牛蛙进入外科麻醉期，即为最佳麻醉状态，此时将牛蛙取出。

2.2.2 插管

根据所研制标本的目的和要求选择灌注的血管，我们通过主动脉与肺动脉对心肝肺进行插管灌注。根据管径的大小及位置选择适合的灌注套管。插管的具体操作如下：

在插管之前，首先在动脉圆锥与肺动脉连接处用缝线结扎肺动脉，接着再进行插管。主动脉向心插管：找到主动脉被剪断的开口，把自制套管针头沿向心方向穿入主动脉中，然后用缝线结扎牢固，再用止血钳固定针头，以防其滑动或穿透血管壁。肺动脉离心插管：首先用眼科剪在靠近肺动脉结扎处0.5cm左右将肺动脉壁剪一针空大小的剪口；接着将自制套管针头沿血流（离心）方向插入肺动脉中并且用缝线结扎牢固，再用止血钳固定针头。

3 结果观察

从制作的心肝肺标本可以看出，铸型的轮廓清楚，成型美观。管道主干饱满，疏密有致；正确地显示心脏的动脉，心室及左右心房的形态结构；牛蛙肝脏血管分支相互交错，可以清楚地看出肝脏的分叶。肺脏血管细小分支显示较为完整。整个标本完整的显示了心肝肺的毗邻关系，展示了心肝肺血管的分布情况。

4 讨论

4.1 ABS的优点

填充剂按其性质可以分为两大类：化学固化型和溶剂挥发固化型。ABS属于溶剂挥发固化型，它不需要保持在一定的温度下进行，操作简便，容易为初学者掌握，制作出来的铸型也美观。ABS是目前使用较广泛的铸型剂，溶解度高、溶解速度快，注入管道后溶剂挥发，留下凝固的ABS，它颗粒细小，易于与色料均匀混合，色彩鲜艳且不褪色，来源广泛，价格低廉，在各大试剂商店均有售。丙酮为一种有机溶剂，挥发性强，水溶性好，填充剂注入管道后，快速经管壁渗入临近组织间隙，再从组织表面挥发，加快管道内铸型剂成形。

4.2 自制套管的优点

由于牛蛙心肝肺较人类小，主动脉与肺动脉亦很细小，若用常规的套管在主动脉与肺动脉插管灌注填充剂[12][13]，会对心肝肺伤害严重，且操作难度大，不易成功。在本实验中，我们根据牛蛙肺动脉和主动脉血管直径的大小制备出了灌注套管。实验表明，这样的灌注套管只需在每次使用之后用丙酮冲洗，放于阴凉处保存即可，可以重复利用，价格低廉，并且灌注过程中套管不易自动脱落，操作方便，在对血管直径较细的标本制作中起到了事半功倍的效果。

4.3 细致设计操作

制作多器官联合铸型标本，不同于单一器官铸型标本的制作，操作比较复杂，设计制作时一定要认真细致，才可以避免操作中出现差错，造成血管灌注不全、浪费材料，增大实验成本。

5 结论

通过实验，制作出了牛蛙心肝肺铸型标本，其轮廓清楚，成型美观。管道主干饱满，疏密有致；正确地显示出了心脏的动脉、心室及左右心房的形态结构；牛蛙肝脏血管分支相互交错，可以清楚地看出肝脏的分叶。肺脏血管细小分支显示较为完整。整个标本完整的显示了心肝肺的毗邻关系，展示了心肝肺血管的分布情况。

参考文献：

[1] David Michael McMullan， Frank L. Hanley ，R. Kirk Riemerb. A method for selectively limiting lumen diameter in corrosion casting[J]. Microvascular Research.2008，67（3）：21 5-217.

[2] 刘畅，韩冰，刘志明等. 犬心肝肺管道铸型标本的制作[J].中国比较医学杂志，2009，1（1）：19.

[3] 石谨，王兴海，李忠华等. 心肺肝铸型标本的设计与制作 [J].解剖学杂志，2007，22（6）：561-562.