李海英 袁柱良

摘 要 对于蔬菜中有机磷与氨基甲酸酯类农药的检测可采用植物酶抑制技术，在预处理样品时可使用小柱，以此可将叶绿素的干扰有效去除，致力于检测灵敏度的显著提高。

关键词 植物酶抑制技术；蔬菜；有机磷；氨基甲酸酯类农药

当下，关于检测痕量、微量有机磷与氨基甲酸酯类农药残留多采用酶化学比色分析法，但是乙酰胆碱酶来源于动物体，材料比较昂贵且很难保存，由此植物水解酶代替乙酰胆碱酯酶的分析方法应运而生，使用植物水解酶可对2，6-二氯乙酰靛酚进行有效水解，按照反应溶液在水解前后的颜色变化，关于农药对于酶的抑制程度，在辨别时刻使用眼睛或仪器，有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在会抑制植物水解酶的活性，因此靛酚的颜色会逐渐变浅[1]。

1 仪器与试剂

LD4-2离心机、XK95-I型多用振荡器、带恒温装置等。

2，6-二氯乙酰靛酚；磷酸盐缓冲液；面粉酶溶液等。

2 样品预处理

预处理柱：取一10ml塑料离心试管，直径为1cm，在其底部钻一小孔（直径为2mm），然后加入1g硅藻土545、少量玻璃纤维。

取10g蔬菜菜叶，适当的剪碎后放置在25ml离心管中，加入磷酸盐缓冲液10ml，进行1min振荡，然后在预处理柱中倒入液体，接收引流液，即为样品溶液[2]。

3 定性与定量分析

定性分析：取试管两支，分别加入2.7ml样品溶液、2.7ml磷酸鹽缓冲液，然后各加入植物酶溶液0.2ml，放置在40℃下恒温10分钟，然后分别加入2，6-二氯乙酰靛酚0.1ml，40℃下再恒温10分钟，对两试管中溶液颜色进行比较与分析。如果样品溶液蓝色较浅或呈橙色，则说明有效抑制了酶活性，含有有机磷或氨基甲酸酯类农药出现在样品中。……