王辉明 吕志强 张颢儿 潘冬琦 王鹏瑞 刘红兵

中圖分类号 R932;R284 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2019）22-3109-04

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.22.17

摘 要 目的：比较山东莱阳、河北安国、内蒙古赤峰3个产地北沙参挥发油成分的差异。方法：采用水蒸气蒸馏法提取不同产地北沙参挥发油并计算提取率。利用气质联用（GC-MS）技术分析挥发油成分，采用Xcalibur工作站对数据进行校正，采用NIST 11.0质谱数据库进行化合物检索（匹配度>800），以峰面积归一化法求得各化学成分的相对质量分数。结果：莱阳北沙参的挥发油提取率为0.013%，远低于安国北沙参（0.099%）和赤峰北沙参（0.105%）。分别从3个产地北沙参挥发油中鉴定出了15、18、27个化合物，相对质量分数分别为89.29%、96.76%、94.53%;镰叶芹醇是不同产地北沙参挥发油中相对质量分数最高的共有化合物，相对质量分数分别为69.79%、90.89%、71.04%;莱阳产北沙参富含脂肪酸类成分，安国和赤峰产北沙参富含C15H24型倍半萜类成分。结论：不同产地北沙参的挥发油成分有较大差异，提示应将其作为区分不同产地北沙参的化学标志物。

关键词 北沙参;产地;挥发油;成分;气相色谱-质谱联用;镰叶芹醇;化学标志物

Comparative Analysis of Volatile Oil Constituents of Glehnia littoralis from Different Producing Areas

WANG Huiming1，LYU Zhiqiang1，ZHANG Haoer2，PAN Dongqi1，WANG Pengrui2，LIU Hongbing2，3（1. Drug Purchase Office， the Affiliated Hospital of Qingdao University， Shandong Qingdao 266000， China; 2. School of Pharmacy， Ocean University of China， Shandong Qingdao 266003， China; 3. Qingdao National Pilot Laboratory of Marine Science and Technology， Functional Laboratory of Marine Drugs and Biological Products，Shandong Qingdao 266237，China）

ABSTRACT   OBJECTIVE： To compare the difference in volatile oil constituents of Glehniae littoralis from 3 producing areas as Shandong Laiyang， Hebei Anguo， Inner Mongolian Chifeng. METHODS： The method of steam distillation was used to extract the volatile oil of G. littoralis from different areas and calculate the extraction rate. The constituents of volatile oil were analyzed by using GC-MS. The data was corrected by Xcalibur chemical workstation. The constituents were searched by NIST 11.0 mass spectrometry database （matching degree >800）， and the relative mass fraction of each chemical constituent was obtained by peak area normalization. RESULTS： The extraction rate of volatile oil in G. littoralis from Laiyang was 0.013%， which was far lower than G. littoralis from Anguo （0.099%） and G. littoralis from Chifeng （0.105%）. There were 15， 18 and 27 constituents identified in volatile oil of G. littoralis from 3 producing areas; the relative mass fractions were 89.29%， 96.76%， 94.53%. Falcarinol was a common compound with the highest relative mass fraction of the volatile oil of G. littoralis from different producing areas; the relative mass fractions were 69.79%， 90.89% and 71.04%， respectively. Fatty acids were rich in the sample from Laiyang， while C15H24 sesquiterpenoids were rich in the other samples from Anguo and Chifeng. CONCLUSIONS： Volatile oil of G. littoralis could be used as potential chemical markers to distinguish different producing areas due to their significant differences in chemical components.

KEYWORDS   Glehniae littoralis; Producing area; Volatile oil; Constituents; GC-MS; Falcarinol; Chemical marker

北沙参为伞形科珊瑚菜属植物珊瑚菜（Glehnia littoralis Fr. Schmidt ex Miq.）的干燥根，具有养阴清肺、益胃生津之功效，常用于治疗肺热燥咳、劳嗽痰血、胃阴不足、热病津伤、咽干口渴等[1]。山东莱阳是北沙参的传统道地产区，所产北沙参以“莱阳沙参”“莱胡参”著称，但其种植面积与产量却逐年萎缩;另一方面，河北与内蒙古的北沙参引种区域在不断扩大，加之价格便宜，已成为该品种的主流产区[2-3]。关于上述3个主产地所产北沙参的质量是否存在差异，尚无相关研究。化学成分是中药发挥药效的物质基础，不同产地北沙参药材的化学成分是否存在差异、可用于区分不同产地以及可用于控制质量的标志性成分是什么，都是值得深入研究的课题。2015年版《中国药典》（一部）中收录的北沙参项仅有性状和显微鉴别项，而未见化学成分相关检查项。鉴于北沙参的化学及生物活性研究较少、化学标志物不明确[4]，笔者对3种主要产地的北沙参药材的化学成分进行了比较研究，以期为该药材的采收加工、质量评价、药效物质等研究提供基础数据。现将不同产地北沙参挥发油成分及相对含量分析结果报道如下。

1 材料

1.1 仪器

Trace1300型气质联用（GC-MS）仪，含ISQ型单四极杆质谱仪、Xcalibur化学工作站、NIST MS Search 2.0数据库（美国Thermo Fisher Scientific公司）;AL204-IC型电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司];DK-98-ⅡA型电热恒温水浴锅、101-2AB型电热鼓风干燥箱、98-Ⅰ-B型电子调温电热套（天津市泰斯特仪器有限公司）;HGC-24A型氮吹仪（天津市恒奥科技发展有限公司）。

1.2 药材与试剂

北沙参药材均购自青岛善大天源饮片有限公司，分别产自山东莱阳大夼镇（批号：20180306;产地加工方式：沸水烫后除去外皮）、河北安国常庄乡（批号：2018030;产地加工方式：沸水烫后除去外皮）和内蒙古赤峰营子乡（批号：20180308;产地加工方式：直接晒干）等3个产区，分别简称为“莱阳北沙参”“安国北沙参”“赤峰北沙参”。药材均于2018年3月在相应产地采购，并经中国海洋大学医药学院生药学教研室刘红兵教授鉴定为伞形科珊瑚菜属植物珊瑚菜（G. littoralis Fr.Schmidt ex Miq.）的干燥根。标本保存于中国海洋大学医药学院海洋中药样品库。

无水硫酸钠、无水乙醚、正己烷等均为分析纯;水为蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 北沙参挥发油的提取

参考文献[5-6]采用水蒸气蒸馏法进行挥发油提取。取不同产地北沙参药材粉碎，过二号筛后，精密称取上述粉末100 g，置于1 000 mL圆底烧瓶中，加水450 mL;连接挥发油测定器与回流冷凝管，自冷凝管上端加水至充满挥发油测定器的刻度部分并溢流入烧瓶时为止;将烧瓶置于电热套中，缓缓加热至沸，回流提取5 h。取含油的水层，以等体积无水乙醚萃取3次，合并乙醚层，以无水硫酸钠脱水，氮气吹干，得淡黄色油状物，称定质量并计算提取率。结果显示，莱阳、安国和赤峰所产北沙参的挥发油提取率分别为0.013%、0.099%和0.105%（以挥发油质量占药材干质量的比例进行计算）。

2.2 供试品溶液的制备

取“2.1”项下所得3个产地北沙参挥发油各30 μL，均以正己烷1 mL溶解制成供试品溶液，用于GC-MS分析。

2.3 GC-MS检测条件

2.3.1 色谱条件 色谱柱：DB-5MS柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;升温程序：初始温度为50 ℃，以5 ℃/min升至240 ℃，保持25 min;进样口温度：280 ℃;载气：氦气;流速：2.0 mL/min;进样量：1 μL;分流进样，分流比：1 ∶ 1。

2.3.2 质谱条件 离子源：电子轰击离子源;离子源温度：230 ℃;四极杆温度：150 ℃;电离能：70 eV;质量扫描范围（m/z）：29～600;溶剂延迟时间：4.9 min。

2.4 数据处理及成分分析

将“2.2”项下制备的供试品溶液按“2.3”项下条件进样测定，得总离子流图（图1）。采用Xcalibur工作站对所得GC-MS原始数据进行校正，并采用IXCR软件对色谱峰进行对齐和解卷积处理。采用NIST 11.0质谱数据库进行化合物检索（设置匹配度>800），采用峰面积归一化法求得各化学成分的相对质量分数，结果见表1。

由表1可见，从莱阳、安国、赤峰三地产北沙参挥发油中分别鉴定出了15、18、27种化合物，相对质量分数分别为89.29%、96.76%、94.53%。其中，镰叶芹醇（又称法卡林醇，Falcarinol）是不同产地北沙参挥发油相对含量最高的共有化合物（相对质量分数分别为69.79%、90.89%、71.04%）。除镰叶芹醇外，莱阳北沙参挥发油中相對质量分数超过1%的其他成分有4个，主要为脂肪酸类，分别为2，6-二叔丁基对甲酚、棕榈酸、亚油酸、17-十八炔酸，其中只有棕榈酸的相对质量分数超过5%;安国北沙参挥发油中相对质量分数超过1%的其他成分只有1个，即γ-榄香烯（1.62%），属于倍半萜类;赤峰北沙参挥发油中相对质量分数超过1%的其他成分有7个，主要为倍半萜类，分别为雪松烯、（+）-花侧柏烯、2，6-二叔丁基对甲酚、（+）-α-长叶蒎烯、γ-榄香烯、棕榈酸乙酯、亚油酸乙酯，其中只有γ-榄香烯相对质量分数超过5%。