华杭菊 张丽枫 任丽萍 卢丽莎 郑 艳 陈武进

肺癌是常见恶性肿瘤之一，近年来，因气候环境变化及饮食习惯的改变，其发病率及死亡率逐年上升，根据2017年国家癌症中心的数据显示，肺癌是目前致死原因第一的恶性肿瘤，是男性常见肿瘤发病率第一位[1]。虽然目前肿瘤治疗手段越来越丰富，但其整体预后仍然很差，5年生存率不足20%[2]。而中药复方因其多靶点、多途径特点，大量研究显示，复方中药特别是补益类可改善机体免疫功能，提高生存质量等而广泛应用于临床。基于“肾生骨髓”“肾虚致瘤”及现代医学认为骨髓是免疫活动细胞的主要源泉，故中医学肾本质与免疫有着密切的关系。因此，进一步探究补肾填精方中药复方对 Lewis 肺癌及其T细胞增殖能力影响，探讨补肾填精方改善肺癌细胞肿瘤免疫微环境，抑制细胞增值和诱导细胞凋亡提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物和 Lewis 肺癌细胞株SD大鼠20只，鼠龄6～8周，雄性，体质量(20±2)g；动物级别SPF级，购自上海斯莱克实验动物有限公司，合格证号: SCXK(沪)2017-0003。饲养于福建中医药大学实验室动物房；室温25℃，湿度70%，国家标准固体混合饲料喂养，小鼠自由采食和饮水。小鼠Lewis肺癌细胞株购自南京凯基生物科技发展有限公司，RPMI1640培养液(含10%胎牛血清、100 U/ml的青霉素、100 U/ml的链霉素、pH=7.2)培养，培养箱保持条件为：37℃、5%CO2及饱和湿度。每隔1天进行培养基换液，每3 d传代1次。

1.1.2 主要试剂及仪器补肾填精方(枸杞子、制何首乌和淫羊藿)按照药物计算剂量: 枸杞子30 g,制何首乌30 g和淫羊藿30 g。……